1.一种从桑叶中高效分离纯化咖啡酰基奎宁酸异构体的方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将桑叶进行超声强化提取后浓缩,得到浓缩提取液;
(2)将所述浓缩提取液和水混合进行超声震荡絮凝,使所述浓缩提取液分散于水中,得到上清液;
(3)将所述上清液进行pH诱导液液萃取并将有机层浓缩至干,得到萃取产物;所述pH诱导液液萃取的pH值为4~7;
(4)将所述萃取产物和水混合进行超声震荡絮凝,使所述萃取产物分散于水中,得到上清液,然后进行大孔吸附树脂富集处理,得到富集产物;
(5)将所述富集产物进行高速逆流色谱快速分离,根据高速逆流色谱对应的色谱峰位置分段收集流出液并浓缩至干,分别得到5‑咖啡酰基奎宁酸、4‑咖啡酰基奎宁酸、3‑咖啡酰基奎宁酸;所述高速逆流色谱快速分离用两相溶剂体系为乙酸乙酯‑水溶剂体系。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(1)中超声强化提取用提取剂为乙醇;所述乙醇的体积浓度为30~60%。
3.根据权利要求1或2所述的方法,其特征在于,所述超声强化提取的次数为1~5次,单次的提取时间为30~60min,单次提取用乙醇的体积和桑叶的质量之比为3~5L:1kg。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(2)中浓缩提取液和水的体积比为1:5~10;
所述步骤(2)和步骤(4)中超声震荡絮凝的温度独立地为40~50℃,时间独立地为5~
30min,震荡频率独立地为30~60KHz。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(3)中pH诱导液液萃取所用萃取剂为石油醚、乙酸乙酯或正丁醇,萃取的次数为1~5次。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(4)中大孔吸附树脂富集处理用的树脂包括NKA‑9、NKA‑II、HPD826、AB‑8、D101或HPD100型大孔吸附树脂。
7.根据权利要求1或6所述的方法,其特征在于,所述步骤(4)中大孔吸附树脂富集处理的装柱方法为湿法装柱,保留液面;所述大孔吸附树脂富集处理的上样量为1/3~13/3BV;
所述大孔吸附树脂富集处理的洗脱过程包括依次进行的水洗脱和乙醇洗脱;所述水洗脱用水的体积为1~5BV;所述乙醇洗脱用乙醇的体积浓度为10~40%;所述乙醇洗脱用乙醇的体积为4~10BV。
8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(5)中的富集产物上样量为50~
500mg。
9.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述步骤(5)中浓缩至干后还包括:将浓缩得到的分离产物依次进行低温析晶和重结晶;所述低温析晶和重结晶用溶剂独立地为甲醇、乙醇或乙酸乙酯;所述低温析晶和重结晶的温度独立地为‑4~20℃。