1.一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法,其特征在于,具体按照以下步骤进行:步骤S1,将植物叶片在pH=7.0的研磨液中冰浴研磨得到匀浆液;
步骤S2,吸取匀浆液,然后加入等体积的提取液A,涡旋混匀后得到混合液,提取液A为丙酮和正己烷按照体积比1:1混合得到;
步骤S3,将步骤S2得到的混合液在4℃的条件下离心12-15min,离心速度为12000-
14000r/min;
步骤S4,吸取上清液,然后加入等体积的提取液B,涡旋混匀后得到混合液,提取液B为三氯甲烷溶液;
步骤S5,将步骤S4得到的混合液在4℃的条件下离心3-4min,离心速度为10000-
12000r/min;
步骤S6,吸取上层水相溶液,采用比色法测定上层水相溶液中的H2S含量,即得植物叶片中H2S含量。
2.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法,其特征在于,所述步骤S6,采用比色法测定上层水相溶液中的H2S含量的方法具体为:准确吸取
2-3mL水相溶液,向溶液中加入等体积的反应液C,25℃下反应2min,用紫外分光光度计在
412nm波长处测定吸光度值,反应液C为0.0317g5,5'-二硫代双(2-硝基苯甲酸)溶于200毫升研磨液中得到;
式中,C:根据标准曲线拟合方程计算出所测样品吸光度值对应的H2S浓度,μmol/L;V1:步骤S1所用的研磨液体积,mL;V2:步骤S2吸取的匀浆液体积,mL;V3:步骤S6吸取的水相溶液体积,mL;Fw:步骤S1中植物叶片鲜重,g。
3.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法,其特征在于,所述步骤S1中,研磨液为100mM磷酸钾缓冲液,磷酸钾缓冲液中含10mM EDTA。
4.根据权利要求3所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法,其特征在于,所述研磨液的用量为:每0.15-0.20g植物叶片加入3.0-5.0mL研磨液。
5.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法,其特征在于,所述步骤S2中,涡旋混合的混合速度为2800-3000r/min,混合时间为15-18s。
6.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法,其特征在于,所述步骤S3中,离心时间为15min。
7.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法,其特征在于,所述步骤S4中,涡旋混合的混合速度为2800-3000r/min,混合时间为15-18s。
8.根据权利要求1所述的一种去除植物叶片中总叶绿素干扰H2S含量测定的方法,其特征在于,所述步骤S5中,离心时间为3min。