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专利号: 2019103161328
申请人: 安徽师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-08
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种黑曲霉6-4光修复酶,其特征在于:其具有SEQ ID NO.1的核苷酸序列。

2.一种表达载体,所述的载体为重组质粒,其特征在于:该重组质粒为含有权利要求1所述的SEQ ID NO.1的核苷酸序列基因的pET-22b(+)重组质粒。

3.一种宿主细胞,其特征在于:所述的宿主细胞为大肠杆菌且含有权利要求2所述的表达载体。

4.一种黑曲霉6-4光修复酶的构建方法:包括以下步骤:

从现有的野生型(wild-type,WT)黑曲霉(Aspergillus niger)中获得6-4光修复酶基因基因An6-4,重新设计核苷酸序列,选择大肠杆菌表达系统偏好的密码子进行优化,得到改造后的基因An6-4';

将改造后的基因An6-4'与pET22b质粒连接,构建具Amp抗性的重组表达载体pET22b-An6-4';

将pET22b-An6-4'重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞,构建用于An6-4'表达的基因工程菌Rosetta(DE3)/pET22b-An6-4';

采用Ni2+离子亲和层析法及SDS-PAGE电泳,进行纯化,即可。

5.权利要求1所述的黑曲霉6-4光修复酶在生物医药、化妆品领域的应用。