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专利号: 2019103360872
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种与辣椒果实辣味性状相关的插入/缺失片段,其特征在于,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.权利要求1所述的插入/缺失片段在筛选辣椒素含量高低性状或在制备筛选辣椒素含量高低性状的试剂盒中的应用。

3.一种用于筛选辣椒素含量高低性状的InDel分子标记,其特征在于,包括上游引物和下游引物,其序列依次如SEQ ID NO.3~4所示。

4.一种筛选/预测辣椒或其子代的辣椒素类物质含量高低的方法,其特征在于,包括如下步骤:S1.提取待测辣椒的基因组DNA;

S2.检测步骤S1所述基因组中是否存在SEQ ID NO.1所示的插入/缺失片段;

S3.结果判定:若基因组中存在SEQ ID NO.1所示的插入/缺失片段,则表示待测辣椒中辣椒素类物质含量高;若不在,则表示辣椒素类物质含量较低。

5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,步骤S2所述检测为以步骤S1所述基因组DNA为模板,用权利要求3所述的InDel分子标记进行PCR扩增反应;若获得434bp片段则表示待测辣椒或其子代含有较高含量的辣椒素类物质,若出现368bp条带则表示待测辣椒素类物质含量较低。

6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述PCR的反应体系为:10μL Taq酶PCR Mix,上下游引物各1μL,DNA模板50ng,加ddH2O至20mL。

7.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,所述PCR的反应程序为:95℃预变性10min;

95℃变性10s,55℃退火10s、72℃延伸30s,重复35个循环;72℃延伸10min。

8.一种用于筛选/预测辣椒或其子代的辣椒素类物质的试剂盒,其特征在于,包含用于检测权利要求1所述插入/缺失片段的引物对。

9.根据权利要求8所述的试剂盒,其特征在于,所述引物对包括上游引物和下游引物,其序列依次如SEQ ID NO.3~4所示。

10.权利要求1所述插入/缺失片段或权利要求3所述InDel分子标记在辣椒辅助育种中的应用。