1.一种L-泛解酸内酯脱氢酶,其特征在于,所述L-泛解酸内酯脱氢酶来源于Nocardia farcinica,其氨基酸序列如SEQ ID No:2所示。
2.分离的多核苷酸,其特征在于,所述多核苷酸是编码权利要求1所述的L-泛解酸内酯脱氢酶的多核苷酸。
3.如权利要求2所述的多核苷酸,其特征在于,所述多核苷酸的核苷酸序列选自下组:(3a)SEQ ID No:1所示的核苷酸序列;(3b)与(3a)所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。
4.一种载体,其特征在于,所述载体含有权利要求2所述的多核苷酸。
5.一种重组细胞,其特征在于,所述重组细胞含有权利要求4所述的载体或基因组中整合有权利要求2所述的多核苷酸。
6.权利要求1所述的L-泛解酸内酯脱氢酶在催化L-泛解酸内酯生成D-泛解酸内酯中的应用。
7.一种多酶重组细胞,其特征在于,所述多酶重组细胞诱导产生权利要求1所述L-泛解酸内酯脱氢酶和D-酮基泛解酸内酯还原酶。
8.如权利要求7所述的多酶重组细胞,其特征在于,所述D-酮基泛解酸内酯还原酶来源于酿酒酵母,其氨基酸序列如SEQ ID No:4所示。
9.如权利要求8所述的多酶重组细胞,其特征在于,编码所述D-酮基泛解酸内酯还原酶的多核苷酸序列选自下组:(9a)SEQ ID No:3所示的核苷酸序列;(9b)与(9a)所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。
10.如权利要求7所述的多酶重组细胞,其特征在于,所述多酶重组细胞还诱导产生葡萄糖脱氢酶。
11.如权利要求10所述的多酶重组细胞,其特征在于,所述葡萄糖脱氢酶来源于微小杆菌,其氨基酸序列如SEQ ID No:6所示。
12.如权利要求11所述的多酶重组细胞,其特征在于,编码所述葡萄糖脱氢酶的多核苷酸序列选自下组:(12a)SEQ ID No:5所示的核苷酸序列;(12b)与(12a)所述的核苷酸序列互补的核苷酸序列。
13.多酶重组细胞的构建方法,其特征在于,包括:
步骤一,将权利要求2所述的多核苷酸插入第一载体,得到第一重组载体;将权利要求9所述的多核苷酸插入第二载体,得到第二重组载体;以及步骤二,将所述第一重组载体和第二重组载体导入宿主细胞,得到多酶重组细胞。
14.如权利要求13所述的构建方法,其特征在于,所述步骤一中,将权利要求9和权利要求12中所述的多核苷酸分别插入第二载体,得到第二重组载体。
15.如权利要求13或14所述的构建方法,其特征在于,所述第一载体为pET-28b,所述第二载体为pACYCDuet-1,所述宿主细胞为E.coli BL21(DE3)。
16.一种制备D-泛解酸内酯的方法,其特征在于,利用多酶重组细胞诱导产生的L-泛解酸内酯脱氢酶和D-酮基泛解酸内酯还原酶催化L-泛解酸内酯生成D-泛解酸内酯。
17.如权利要求16所述的方法,其特征在于,所述多酶重组细胞还诱导产生葡萄糖脱氢+酶,以葡萄糖作为辅底物,利用所述葡萄糖脱氢酶连续催化反应体系中的NADP 转化为NADPH。
18.如权利要求16所述的方法,其特征在于,所述方法还包括:从反应后的反应体系中分离出D-泛解酸内酯。