1.L‑泛解酸内酯脱氢酶在催化L‑泛解酸内酯生成D‑泛解酸内酯中的应用,其特征在于,所述L‑泛解酸内酯脱氢酶来源于Cnuibacter physcomitrellae,其氨基酸序列如SEQ ID No:2所示。
2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述编码权利要求1所述L‑泛解酸内酯脱氢酶的多核苷酸的核苷酸序列为SEQ ID No:1所示的核苷酸序列。
3.一种多酶重组细胞,其特征在于,所述多酶重组细胞诱导产生权利要求1所述L‑泛解酸内酯脱氢酶和D‑酮基泛解酸内酯还原酶;
所述L‑泛解酸内酯脱氢酶来源于Cnuibacter physcomitrellae,其氨基酸序列如SEQ ID No:2所示;
所述D‑酮基泛解酸内酯还原酶来源于酿酒酵母,其氨基酸序列如SEQ ID No:4所示;
所述重组细胞为非植物品种。
4.如权利要求3所述的多酶重组细胞,其特征在于,编码所述D‑酮基泛解酸内酯还原酶的多核苷酸序列为SEQ ID No:3所示的核苷酸序列。
5.如权利要求3所述的多酶重组细胞,其特征在于,所述多酶重组细胞还诱导产生葡萄糖脱氢酶。
6.如权利要求5所述的多酶重组细胞,其特征在于,所述葡萄糖脱氢酶来源于微小杆菌,其氨基酸序列如SEQ ID No:6所示。
7.如权利要求6所述的多酶重组细胞,其特征在于,编码所述葡萄糖脱氢酶的多核苷酸序列为SEQ ID No:5所示的核苷酸序列。
8.多酶重组细胞的构建方法,其特征在于,包括:步骤一,将权利要求2所述的多核苷酸插入第一载体,得到第一重组载体;将权利要求4所述的多核苷酸插入第二载体,得到第二重组载体;以及步骤二,将所述第一重组载体和第二重组载体导入宿主细胞,得到多酶重组细胞。
9.如权利要求8所述的构建方法,其特征在于,所述步骤一中,将权利要求4和权利要求
7中所述的多核苷酸分别插入第二载体,得到第二重组载体。
10.如权利要求8或9所述的构建方法,其特征在于,所述第一载体为pET‑28b,所述第二载体为pACYCDuet‑1,所述宿主细胞为E. coli BL21(DE3)。
11.一种制备D‑泛解酸内酯的方法,其特征在于,利用多酶重组细胞诱导产生的L‑泛解酸内酯脱氢酶和D‑酮基泛解酸内酯还原酶催化L‑泛解酸内酯生成D‑泛解酸内酯;
所述L‑泛解酸内酯脱氢酶来源于Cnuibacter physcomitrellae,其氨基酸序列如SEQ ID No:2所示;
所述D‑酮基泛解酸内酯还原酶来源于酿酒酵母,其氨基酸序列如SEQ ID No:4所示。
12.如权利要求11所述的方法,其特征在于,所述多酶重组细胞还诱导产生葡萄糖脱氢+
酶,以葡萄糖作为辅底物,利用所述葡萄糖脱氢酶连续催化反应体系中的NADP 转化为NADPH。
13.如权利要求11所述的方法,其特征在于,所述方法还包括:从反应后的反应体系中分离出D‑泛解酸内酯。