1.一种同时测血清中尼古丁、3-(吡咯烷-2-基)吡啶、吡啶吡咯酮以及睾酮含量的方法,其特征在于包括以下步骤:(1)使用经前处理的血清空白基质以及一系列不同溶度不同目标物配置的标准溶液,利用液相串联质谱检测,绘制标准曲线,所述的目标物为尼古丁、3-(吡咯烷-2-基)吡啶、吡啶吡咯酮或睾酮;
(2)对待检测血清样品进行前处理,然后利用液相串联质谱检测;
(3)根据标准曲线计算同时得出血清样品中的尼古丁、3-(吡咯烷-2-基)吡啶、吡啶吡咯酮以及睾酮的含量;
所述的步骤(1)和步骤(2)的前处理为:将待处理的血清,加入预冷的乙腈,然后涡旋和超声后冷冻离心分离,移取全部上清,再次加入预冷的乙腈,然后涡旋后冷冻离心,移取全部上清,过0.22μm滤膜,得到待检样品;
所述的步骤(1)和步骤(2)中的液相串联质谱中液相方法包括有:流动相方法和固定相方法;
所述的流动相方法基于梯度洗脱,其操作条件为基于时间的各参数为:时间:0.00、0.20、1.20、2.20、2.21、4.00,单位为分钟;
流速:0.50、0.50、0.50、0.50、0.50、0.50,单位为ml/min;
乙腈与含0.1%甲酸的水的流动性比例为:5:95、5:95、90:10、90:10、5:95、5:95;
所述固定相方法为选用1.8μm、2.1x100mm的ACQUITY UPLC HSS T3柱,柱温箱温度37℃;
分别对应离子对:3-(吡咯烷-2-基)吡啶、尼古丁、吡啶吡咯酮、睾酮的质谱方法的操作条具体为:定量离子对:149.06->132.09、163.16->130.09、177.14->80.04、289.30->109.07;
锥孔电压:30V、30V、10V、6V;
碰撞能量:12V、18V、21V、24V;
定性离子对:149.06->130.07、163.16->132.10、177.14->146.07、289.30->97.08;
锥孔电压:30V、30V、10V、6V;
碰撞能量:16V、14V、17V、22V。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于所述步骤(1)中的不同溶度为:浓度为
0.0001ng/mL、0.0002ng/mL、0.0005ng/mL、0.001ng/mL、0.002ng/mL、0.005ng/mL、0.01ng/mL、0.02ng/mL、0.05ng/mL、0.1ng/mL、0.2ng/mL、0.5ng/mL、1.0ng/mL、2.0ng/mL、5.0ng/mL、
10ng/mL、20ng/mL、50ng/mL、100ng/mL。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于:该方法定量限较低,3-(吡咯烷-2-基)吡啶、吡啶吡咯酮以及睾酮定量限低至0.1ng/mL,尼古丁定量限低至1.0ng/mL。