1.一种鉴别褐菖鲉和三色菖鲉的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1:总DNA提取;
S2:以线粒体12S rRNA基因的部分序列作为分子标记序列进行PCR扩增;
S3:PCR产物的回收纯化;
S4:测序;
其中,所述PCR扩增用分子标记引物包括正向引物和反向引物:所述正向引物序列为:5’‑GTCGGTAAAACTCGTGCCAGC‑3’;
所述反向引物序列为:5’‑CATAGTGGGGTATCTAATCCCAGTTTG‑3’其中,所述PCR扩增的反应体系中添加有四氢呋喃和柠檬酸铵;
所述鉴别褐菖鲉和三色菖鲉的方法的判断标准为:测序可得,三色菖鲉的分子标记序列为SEQ ID NO.4所示,褐菖鲉的分子标记序列为SEQ ID NO.3所示。
2.根据权利要求1所述的一种鉴别褐菖鲉和三色菖鲉的方法,其特征在于:所述总DNA提取的材料来源为肌肉组织。
3. 根据权利要求1或2所述的一种鉴别褐菖鲉和三色菖鲉的方法,其特征在于:所述PCR扩增的反应体系为:ddH2O 10.5‑31.5μL,10×buffer 1.5‑4.5μL, dNTPs1.2‑3.6μL,Taq酶0.1‑0.27μL,DNA模板0.6‑1.8μL,分子标记引物各0.6‑1.8μL。
4.根据权利要求3所述的一种鉴别褐菖鲉和三色菖鲉的方法,其特征在于:所述DNA模板的浓度为40‑80ng/μL。
5. 根据权利要求1或2所述的一种鉴别褐菖鲉和三色菖鲉的方法,其特征在于:所述PCR扩增程序为:94‑95℃预变性4‑5min,然后94‑95℃变性44‑46s,49‑52℃退火44‑46s,70‑
74℃延伸 44‑46s,进行33‑37个循环,最后70‑74℃延伸8‑12min。
6.根据权利要求1或2所述的一种鉴别褐菖鲉和三色菖鲉的方法,其特征在于:所述PCR产物的回收纯化采用玻璃奶法。
7.根据权利要求1所述的一种鉴别褐菖鲉和三色菖鲉的方法,其特征在于:所述测序方式为双向测序。