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专利号: 2019106139631
申请人: 宁波大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-04-03
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种测定土壤中PCB72和PCB106多氯联苯的方法,包含如下步骤:(1)AuNMPs@HCR的制备;

(2)标准样品处理:将10‑300μL的PCB72和PCB106的混标多氯联苯和5‑15mL蒸馏水置于顶空瓶中,调pH值至6‑8,混匀样品;

(3)顶空固相微萃取:将步骤(1)制备得到的AuNMPs@HCR吸附在一个磁子上得到A磁子,将A磁子用细铁丝固定在顶空瓶的瓶盖上并密封进行萃取,萃取温度为0‑60℃,萃取时间为

10‑120min;

(4)目标物洗脱:将吸附多氯联苯的A磁子取下,置于烧瓶中,加入乙醇并在磁力搅拌下洗脱得到洗脱液,搅拌速率为200‑600rmp,洗脱时间为1‑60min,乙醇用量为1‑5mL;

(5)气相色谱‑质谱联用:用进样针取洗脱液1μL,打入气相色谱‑质谱联用仪进样口,启动数据采集仪器采集数据;

(6)数据处理:改变所述标准样品处理中的所述混标多氯联苯的加入量,重复上述步骤(2)、(3)、(4)和(5)5次,得到6组多氯联苯的数据,绘制标准曲线;

(7)真实样品处理和测定:将待测泥土样品1‑20.0g置于顶空瓶中,加入5‑15mL蒸馏水,调pH值至6‑8,混匀样品;重复上述步骤(3)、(4)和(5)得到数据,并代入已绘制的标准曲线,计算得到泥土样品的多氯联苯浓度;

所述步骤(1)包含步骤(1‑1)、(1‑2)、(1‑3)和(1‑4),(1‑1)Fe3O4纳米粒子的制备,

(1‑2)金纳米粒子的制备,

(1‑3)金纳米粒子修饰Fe3O4纳米粒子得到Fe3O4@AuNPs,即AuNMPs,(1‑4)AuNMPs@HCR的制备:将AuNMPs置于10‑100μL浓度为10μM巯基化的引物链溶液中,

4℃条件下放置24小时,随后磁性分离产物并用PBS缓冲溶液冲洗数次,再加入到H1‑Apt和H2‑Apt的混合溶液中,该混合溶液的体积和浓度分别为100μL、10μM,并在20‑30℃下放置

2h,最后,磁性分离后并用PBS缓冲溶液洗涤数次得产物AuNMPs@HCR,其中,所述引物链的浓度为10μM,引物链序列组成为:SH‑(CH2)6‑AGA GTG ATG GAG ATT CAG CTT AGC;

H1‑Apt序列组成为:

CACTCGGACCCCATTCTCCTTCCATCCCTCATCCGTCCACGCTAAGCTGAATCTCCATCACTCTGTAAGTCTAGGTAGAGTGATGGAGATTC;

H2‑Apt序列组成为:

CACTCGGACCCCATTCTCCTTCCATCCCTCATCCGTCCACAGAGTGATGGAGATTCAGCTTAGCGAATCTCCATCACTCTACCTAGACTTAC;所述步骤(5)中的气相色谱‑质谱的条件为:

色谱柱:Rxi‑5ms,30m×0.25mm×0.25μm;

进样口温度:240℃;

程序升温条件:初始温度为110℃,保持2min;以20℃/min的速度升温至230℃,保持

2min;再以5℃/min的速度升温至250℃,保持2min;再以20℃/min的速度升温至280℃,保持

2min;

电离模式:EI;

选择离子:PCB72:m/z292、290、362;PCB106:m/z324、326、328。

2.根据权利要求1所述的测定土壤中PCB72 和 PCB106 多氯联苯的方法,所述步骤(1‑

1)、(1‑2)和(1‑3)如下,

(1‑1)Fe3O4纳米粒子的制备:将1.35g的FeCl3·6H2O和3.6g的无水醋酸钠加入到40ml乙醇中超声溶解,得到的黄色溶液,转移到反应釜中,密封,180‑220℃下反应5‑16小时,反应完后冷却至室温并磁性分离,所得的黑色固体用去离子水和乙醇反复超声洗涤两次,并真空干燥后储存待用;

(1‑2)金纳米粒子的制备:将50‑200mL质量浓度为0.01%的HAuCl4溶液加入到圆底烧瓶中,放在磁力搅拌器上加热并搅拌,煮沸后,迅速加入1‑5mL质量浓度为1%的柠檬酸钠溶液,并剧烈搅拌,溶液变到橙红色,待溶液颜色不再发生变化后,继续加热10min后停止,冷却至室温,所得产物AuNPs溶液置于3‑8℃保存待用;

(1‑3)金纳米粒子修饰Fe3O4纳米粒子得到AuNMPs的制备:将5‑20mg的Fe3O4纳米粒子置于离心管中,并加入200‑400ml的上述AuNPs溶液,充分摇晃后磁性分离,得到Fe3O4@AuNPs。