1.一种植株快速遗传转化或感染病毒的方法,其特征在于,包括如下步骤:
(1)制备无顶芽茎段:将植株顶芽切掉,将茎切成若干个带有一个侧枝或一片复叶的茎段,筛选出其中含腋芽的茎段;
(2)无顶芽茎段的预培养:将人工剪取的无顶芽茎段种在培养基质中培养;
(3)制备农杆菌菌液并注射于无顶芽茎段:制备含有病毒介导的基因沉默载体的农杆菌菌液和/或含有DNA病毒侵染性克隆的农杆菌菌液,并将其注射于无顶芽茎段;
(4)无顶芽茎段的暗培养:置于黑暗条件下培养;
(5)无顶芽茎段腋芽的剥离,腋芽的种植;将暗培养结束的茎段继续培养,将表现症状的腋芽从茎段上取下,种于培养基质中培养;
所述步骤(1)制备无顶芽茎段具体为:取35‑40cm高的植株,将顶芽切掉,将茎切成若干个带有一个侧枝或一片复叶的茎段,每个茎段长4‑6cm,茎的形态学上端切口为平切口,形态学下端切口角度为30°,筛选出其中含腋芽的茎段,腋芽长度为1‑3cm;茎段的形态学上切口距离侧枝或复叶基部为2 .5‑3 .5cm,形态学下切口距离侧枝或复叶基部为1 .5‑2 .5cm;
所述无顶芽茎段具有不对称“Y”型结构。
2.如权利要求1所述的一种植株快速遗传转化或感染病毒的方法,其特征在于,所述侧枝长度大于10cm,则切断侧枝顶部,保留侧枝3‑5片叶。
3.如权利要求1所述的一种植株快速遗传转化或感染病毒的方法,其特征在于,所述步骤(2)无顶芽茎段的预培养具体为:需将人工剪取的无顶芽茎段种在培养基质中,置于23‑
26℃、光照强度1200‑1800Lux、光照时间16h/d的环境培养1d;所述培养基为松针土和蛭石以1:0 .5‑0 .7的比例混合。
4.如权利要求1所述的一种植株快速遗传转化或感染病毒的方法,其特征在于,所述步骤(3)制备农杆菌菌液并注射于无顶芽茎段具体为:制备含有病毒介导的基因沉默载体的农杆菌菌液和/或含有DNA病毒侵染性克隆的农杆菌菌液,并将其注射于无顶芽茎段,注射部位在所述无顶芽茎段的形态学上端切口,注射0 .5‑1ml菌液持续1‑2min,拔出针头使菌液在上切口处自然形成一层液膜。
5.如权利要求4所述的一种植株快速遗传转化或感染病毒的方法,其特征在于,所述步骤(4)无顶芽茎段的暗培养具体为:保持所述液膜不滑落,置于23‑26℃、相对湿度80‑90%、黑暗的条件下培养24h‑48h。
6.如权利要求1所述的一种植株快速遗传转化或感染病毒的方法,其特征在于,所述步骤(5)无顶芽茎段腋芽的剥离,腋芽的种植具体为:将暗培养结束的茎段置于保湿、温度23‑
26℃、光照强度1200‑1800Lux、光照时间16h/d的防虫温室中培养5‑10d后,将表现症状的腋芽从茎段上取下,种于培养基质中,置于保湿,温度23‑26℃、光照强度1200‑1800lux、光照
16h/d的防虫温室中培养,所述培养基质为松针土和蛭石以1:0 .5‑0 .7的比例混合。