1.一种单分子计数检测基因组中DNA损伤的荧光化学传感器,其特征在于,所述荧光化学传感器至少包括末端转移酶、生物素化的双脱氧核苷酸、生物素化的核苷酸、荧光标记的核苷酸、DNA糖基化酶和AP内切核酸酶1。
2.如权利要求1所述的荧光化学传感器,其特征在于,所述DNA糖基化酶与待测DNA损伤具体类型相对应;
优选的,
当检测8-oxoG引起的DNA损伤时,所述DNA糖基化酶为甲酰胺嘧啶DNA糖基化酶;
当检测尿嘧啶引起的DNA损伤时,所述DNA糖基化酶为尿嘧啶DNA糖基化酶;
当检测脱氧肌苷引起的DNA损伤时,所述DNA糖基化酶为人类烷基腺嘌呤DNA糖基化酶。
3.如权利要求1所述的荧光化学传感器,其特征在于,所述荧光化学传感器还包括链霉抗生物素蛋白包被的磁珠。
4.如权利要求1所述的荧光化学传感器,其特征在于,所述DNA损伤包括孤立的损伤位点和聚集的损伤位点。
5.基于权利要求1-4任一项所述荧光化学传感器检测基因组中DNA损伤的方法,所述方法包括:S1、向待测物中加入生物素化的双脱氧核苷酸和末端转移酶进行孵育,然后加入链霉抗生物素蛋白包被的磁珠进行分离;
S2、加入DNA糖基化酶和AP内切核酸酶1进行孵育处理;
S3、加入生物素化的核苷酸和末端转移酶进行孵育处理;
S4、向分离的生物素化的DNA链中加入荧光核苷酸和末端转移酶避光孵育处理,经磁分离和外切酶消化,进行单分子成像。
6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述步骤S1中,孵育具体条件为:35~40℃(优选37℃)下孵育处理0.5~1.5小时(优选为1小时)。
7.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所所述步骤S2中,DNA糖基化酶与待测DNA损伤具体类型相对应;
孵育具体条件为:35~40℃(优选37℃)下孵育处理0.5~1.5小时(优选为1小时)。
8.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述步骤S3中,孵育具体条件为:35~40℃(优选37℃)下孵育处理0.4~1小时(优选为0.5小时)。
9.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述步骤S4中,避光孵育具体条件为:35~40℃(优选37℃)下孵育处理0.5~1.5小时(优选为1小时);
优选的,所述荧光核苷酸为Cy5修饰的ddUTP;
优选的,所述外切酶为Exo I;
优选的,所述单分子成像为全内反射荧光单分子成像,640nm激光用于激发Cy5分子,对Cy5分子进行计数从而实现对DNA损伤的定量检测。
10.权利要求1-4任一项所述荧光化学传感器和/或权利要求5-9任一项所述检测方法在DNA损伤检测中的应用。