1.基于内滤效应检测硫化氢及活细胞内硫化氢成像的荧光碳点纳米探针,其特征在于:荧光碳点与有机小分子受体基于内滤效应形成荧光碳点纳米探针;
所述荧光 碳点由西红 柿碳化 制备得到 ,有 机小分子受 体化学式 为
。
2.根据权利要求1所述的基于内滤效应检测硫化氢及活细胞内硫化氢成像的荧光碳点纳米探针,其特征在于,所述荧光碳点的合成方法,步骤如下:将新鲜西红柿置于研钵中,充分研磨后过100-260目滤膜得滤液,取一定体积的滤液于水热反应釜中,再加入超纯水加热至250℃并搅拌,10h后停止加热自然冷却至室温,过滤,收集滤液置于透析袋中,在超纯水环境下避光透析24h,取上清液即为荧光碳点。
3.根据权利要求2所述的基于内滤效应检测硫化氢及活细胞内硫化氢成像的荧光碳点纳米探针,其特征在于:所述滤液与超纯水的体积比为3:(20-23);透析袋型号为MWCO: 1 kDa, pore size: ca. 1.0 nm。
4.根据权利要求1所述的基于内滤效应检测硫化氢及活细胞内硫化氢成像的荧光碳点纳米探针,其特征在于,所述有机小分子受体的合成方法,步骤如下:(1)取2,3,3-三甲基-3H-吲哚和碘甲烷混合溶解在乙腈里,在氩气保护下60℃回流
11h,自然冷却到室温,得到一种浅粉色沉淀,过滤,用乙酸乙酯洗三次,真空干燥,得浅粉色粉末;
(2)将步骤(1)得到的浅粉色粉末和4-二氨基苯甲醛混合溶解在10mL乙醇中,在氩气保护下180℃回流4.5h,减压蒸馏,剩余液体经柱层析提纯得到纯净的有机小分子受体。
5.根据权利要求4所述的基于内滤效应检测硫化氢及活细胞内硫化氢成像的荧光碳点纳米探针,其特征在于:所述步骤(1)中2,3,3-三甲基-3H-吲哚在乙腈里的物质的量浓度为
1-4mmol/mL、碘甲烷在乙腈里的物质的量浓度为2-8 mmol/mL。
6.根据权利要求4所述的基于内滤效应检测硫化氢及活细胞内硫化氢成像的荧光碳点纳米探针,其特征在于:所述步骤(2)中,浅粉色粉末在乙醇中的物质的量浓度为0.05mmol/mL、4-二氨基苯甲醛在乙醇中的物质的量浓度为0.075mmol/mL;柱层析提纯采用的试剂为二氯甲烷和乙醇按体积比(20-23):1。
7.权利要求1-6任一项所述的荧光碳点纳米探针在非疾病的诊断应用中检测活细胞内硫化氢成像中的使用方法,其特征在于,步骤为:将荧光碳点和有机小分子受体在细胞培养皿中与活细胞孵育24 h,用PBS缓冲液洗涤细胞除去未进入细胞的液体,采用激光共聚焦显微镜系统进行观察,然后再分别加入多组梯度浓度的硫化钠溶液孵育1h,用PBS缓冲液洗涤细胞除去未进入细胞的液体,采用激光共聚焦显微镜系统进行观察。