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专利号: 2019106908126
申请人: 江西理工大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种多环芳烃底物吸附内衬,其特征在于:所述底物吸附内衬为中空圆柱形或者中空方柱形,其外径比96孔板小孔内径小0.5~1.0mm,壁厚为0.1~0.3mm,柱高为3~7mm,壁体设有多个圆形或椭圆形通孔;所述96孔板小孔内径为10.7±0.2mm或6.8±0.2mm,所述通孔的直径或长轴为0.5~1.0mm。

2.根据权利要求1所述的多环芳烃底物吸附内衬,其特征在于:所述96孔板小孔内径为

10.7±0.2mm,所述底物吸附内衬的外径为10.0±0.2mm,壁厚为0.2~0.3mm,柱高为5.5~

6.5mm,所述通孔的直径或长轴为0.75~0.85mm。

3.根据权利要求1所述的多环芳烃底物吸附内衬,其特征在于:所述96孔板小孔内径为

6.8±0.2mm,所述底物吸附内衬的外径为6.0±0.2mm,壁厚为0.1~0.2mm,柱高为3.5~

4.5mm,所述通孔的直径或长轴为0.55~0.65mm。

4.根据权利要求1至3中任一项所述的多环芳烃底物吸附内衬,其特征在于:所述多环芳烃包括萘、菲、荧蒽、蒽和苯并(a)芘;所述底物吸附内衬的材质为塑料或碳纤维。

5.根据权利要求1至4中任一项所述的多环芳烃底物吸附内衬的吸附方法,其特征在于:包括如下步骤:在可调恒温电炉上放置容器,在容器内铺满干燥的加热介质,在加热介质上放置一耐热玻璃浅盘,底部放置适量多环芳烃晶体,底物上方放置隔帘,将塑料内衬置于隔帘上平整铺好,用盖板将浅盘封闭;根据多环芳烃的种类,设定电炉加热温度及保温时间,得到在表面均匀吸附多环芳烃晶体的内衬。

6.根据权利要求1至5中任一项所述的多环芳烃底物吸附内衬的吸附方法,其特征在于:所述加热介质为过100目筛的河沙;所述隔帘为特氟龙材质,呈网状结构;所述盖板为特氟龙材质。

7.一种筛选多环芳烃降解突变菌的方法,其特征在于:包括如下步骤:

S1)将多环芳烃降解菌悬液滴于温度保持在20~30℃的无菌金属铁片上,置于诱变室内,以氦气作为载体,功率为100~120w,氦气流量为9~11L/min,处理时间15~150s;

S2)诱变完成后,用无菌水洗脱菌膜,采用稀释涂平板法将洗脱液稀释后涂营养琼脂平板,在28~32℃下培养18~24h,平板长出单菌落后,取已灭菌96孔板,取权利要求1至4中任一项所述的多环芳烃底物吸附内衬吸附多环芳烃后,置于96孔板小孔内,然后在小孔内注入无机盐培养基,用接种针挑取单菌落接种到96孔板小孔的无机盐培养基中,28~32℃下静止培养24~72h;

S3)将培养结束后的96孔板置于酶标仪下检测培养液的吸光度值;其中,吸光度值低于对照的,是负突变;吸光度值高于对照的,是正突变。

8.根据权利要求7所述的筛选多环芳烃降解突变菌的方法,其特征在于:所述多环芳烃降解菌采用Moraxella osloensis CFP312,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号为GDMCC No:60595。

9.根据权利要求7所述的筛选多环芳烃降解突变菌的方法,其特征在于:所述酶标仪的检测波长为600nm。

10.根据权利要求7所述的筛选多环芳烃降解突变菌的方法,其特征在于:所述无机盐培养基包括如下组分:Na2HPO4 0.8g/L、KH2PO4 0.2g/L、(NH4)6Mo7O24·4H2O 0.001g/L、(NH4)2SO41g/L、MgSO4·7H2O 0.2g/L、FeCl3·3H2O 0.005g/L、CaCl2·2H2O 0.1g/L。