1.聚乙烯亚胺在定量检测对苯二酚和β-葡萄糖苷酶中的应用。
2.一种对苯二酚的定量检测方法,其特征在于,所述检测方法包括以下步骤:(1)向聚乙烯亚胺溶液和磷酸盐缓冲溶液的混合液中,加入一系列不同浓度的对苯二酚溶液,反应之后,在373nm的激发波长下检测体系的荧光光谱;
(2)以对苯二酚溶液的浓度为横坐标,体系在510nm波长处的荧光强度为纵坐标构建标准曲线,进而定量检测出对苯二酚的浓度。
3.根据权利要求2所述的对苯二酚的定量检测方法,其特征在于,步骤(1)中,聚乙烯亚胺溶液、磷酸盐缓冲溶液的终浓度分别为0.29g/L~0.37g/L、18mM~22mM;所述磷酸盐缓冲溶液的pH为8.0~10.0。
4.根据权利要求2所述的对苯二酚的定量检测方法,其特征在于,步骤(1)中,对苯二酚溶液的终浓度分别为0、0.05、0.3、0.6、0.9、1.2、1.5、1.8、2.1,2.4、2.7、3.0、3.3、3.6、3.9、
4.2、4.5、6.5、9.0、12.0、15.0μM。
5.根据权利要求2所述的对苯二酚的定量检测方法,其特征在于,步骤(1)中,所述反应的条件为55~65℃反应85~95分钟。
6.一种β-葡萄糖苷酶活性的检测方法,其特征在于,包括以下步骤:A、分别使用不同浓度的β-葡萄糖苷酶水解β-熊果苷,得到水解液;
B、向聚乙烯亚胺溶液和磷酸盐缓冲溶液的混合液中,分别加入步骤A得到的水解液,孵育之后,在373nm的激发波长下检测体系的荧光光谱;
C、以β-葡萄糖苷酶的浓度为横坐标,体系在510nm波长处的荧光强度为纵坐标构建标准曲线,进而定量检测出β-葡萄糖苷酶的活性。
7.根据权利要求6所述的β-葡萄糖苷酶活性的检测方法,其特征在于,β-熊果苷、聚乙烯亚胺溶液的终浓度分别为47μM~53μM、0.29g/L~0.37g/L。
8.根据权利要求6所述的β-葡萄糖苷酶活性的检测方法,其特征在于,所述步骤A具体包括以下步骤:将100μL、1.0mMβ-熊果苷溶液与100μL的pH=6.5的40mM磷酸盐缓冲液混合,然后向混合物中加入500μL不同浓度的β-葡萄糖苷酶,以使体系中β-葡萄糖苷酶的终浓度分别为0、1、3、6、9、12、15、18、21、24、27、30、33、36、39、42、45、50、60、70、80、90、100UL-1。
9.根据权利要求6-8任意一项所述的β-葡萄糖苷酶活性的检测方法,其特征在于,所述步骤B中,所述磷酸盐缓冲溶液的pH为8.0~10.0。
10.根据权利要求6-8任意一项所述的β-葡萄糖苷酶活性的检测方法,其特征在于,所述步骤B中,孵育的条件为:55~65℃反应85~95分钟。