1.一种源于碎米荠的抗氧化硒多肽, 其特征在于: 其氨基酸序列为Gly‑Arg‑Val‑Gly‑Ser‑Ser‑Ser‑SeCys,所述SeCys 为硒代半胱氨酸。
2.一种制备如权利要求1 所述的源于碎米荠的抗氧化硒多肽的方法,其特征在于,包括以下步骤:S1、打粉:将碎米荠整株烘干打粉,用无水乙醇脱色2h,以6400r/min 离心15min,将沉淀风干,得到碎米荠粉末;
S2、酶解:将步骤S1 中所述碎米荠粉末加入pH 为8.5 的缓冲液中,所述碎米荠粉末和缓冲液的比例为1g:40mL,再加入碱性蛋白酶进行第一次酶解,酶解温度、时间和酶‑底物配比分别为50℃、4h 和3000U/g,然后加入酸性蛋白酶进行第二次酶解,所述酶解温度、时间和酶‑底物配比分别为50℃、4h 和3000U/g,沸水浴灭酶15min 后迅速冷却至室温,6400r/min 离心15min,取上清液备用;
S3、超滤分离:将步骤S2 中所述上清液并利用膜过滤系统进行超滤分离,利用分子量截留范围不同的超滤膜对酶解产物进行分离,得到不同分子量的多肽,包括>3000Da 和≤
3000Da 的组分;
S4、离子交换层析分离:收集步骤S3 中所述>3000Da 和≤3000Da 的组分中具有最佳抗氧化活性的组分1,所述组分1 经过SephadexDEAE‑FF 离子交换层析进行分离,以含0‑
1mol/LNaCl 的0.05mol/L、pH8.5Tris‑HCl 缓冲液进行线性梯度洗脱,流速为0.5ml/min,收集各组分比较其抗氧化活性,得到抗氧化强的组分2;
S5、RP‑HPLC 分离:采用RP‑HPLC 反相高效液相色谱进一步纯化步骤S4 中所述组分2,所述反相高效液相色谱的色谱柱为C18,所述反相高效液相色谱洗脱条件为:柱温为20℃,洗脱液包括流动相A 和流动相B,流动相A 为纯乙腈,流动相B 组成为0.05%三氟乙酸、5%乙腈和94.95%纯水,洗脱液流速为10mL/min,洗脱条件为0 5min10%A、5 30min 100%A 50%A、~ ~ ~
30 35min 50%A 80%A、35 40min 80%A、40 45min80%A 100%A 和45 50min 100%A,收集各组~ ~ ~ ~ ~ ~分,真空浓缩后冷冻干燥,比较各组分的抗氧化性能,抗氧化性能最强的组分即碎米荠抗氧化硒多肽。
3.一种如权利要求1 所述的源于碎米荠的抗氧化硒多肽在抗氧化功能性食品中的应用。