1.一种基于硫代半菁染料的近红外荧光探针SHCy-P,其特征在于,所述探针可以对酸性磷酸酶进行选择性识别,引起位于近红外区的荧光发射光谱的变化,结构通式如下所示:
2.一种权利要求1所述基于硫代半菁染料的近红外荧光探针SHCy-P的制备方法,其特征在于制备流程如下所示:其步骤如下:
1)将七甲川吲哚花菁染料溶液缓慢滴加至碳酸钾和3-羟基苯硫酚的乙腈溶液中,然后于50℃反应3小时,反应结束后冷却至室温得到反应液;
2)将上述反应液进行抽滤,滤液经减压蒸馏浓缩得到粗产品,粗产品用柱层层析硅胶进行分离、提纯,所用洗脱剂为体积比为100:1-2的二氯甲烷-甲醇混合液,得到具有近红外发射的蓝色中间体SHCy;
3)将上述步骤2)得到的SHCy与三氯氧磷、吡啶加入到圆底烧瓶中,加入干燥二氯甲烷室反应4小时;
4)将上述步骤3)的反应液倒入冰水中搅拌过夜,之后用二氯甲烷萃取,收集有机相并用无水硫酸钠干燥,经减压蒸馏浓缩得到粗产品,粗产品用柱层层析硅胶进行分离、提纯,所用洗脱剂为体积比为100:2-5的二氯甲烷-甲醇混合液,得到蓝色粉末探针SHCy-P。
3.根据权利要求2所述基于硫代半菁染料的近红外荧光探针SHCy-P的制备方法,其特征在于:所述七甲川吲哚花菁染料、碳酸钾和3-羟基苯硫酚的摩尔比为1:2:2;所述七甲川吲哚花菁染料与溶剂乙腈的重量比为1:6-7;所述碳酸钾和3-羟基苯硫酚总重量与溶剂乙腈的重量比为1:14-15。
4.根据权利要求2所述基于硫代半菁染料的近红外荧光探针SHCy-P的制备方法,其特征在于:所述中间体SHCy与三氯氧磷、吡啶的摩尔比为1:1.5:4.5;所述中间体SHCy与二氯甲烷的重量比为1:60-70;所述吡啶与二氯甲烷的体积比为1:60-70;所述冰水与反应液的体积比为4-5:1;所述萃取过程中二氯甲烷与冰水的体积比为2-2.5:1。
5.权利要求1所述的基于硫代半菁染料检测酸性磷酸酶的近红外荧光探针SHCy-P的应用,其特征在于,该探针用于检测溶液和细胞内的酸性磷酸酶。