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专利号: 2019108262289
申请人: 华南农业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种新型钙螯合肽,其特征在于,所述钙螯合肽的氨基酸序列为:YQEPVIAPKL。

2.根据权利要求1所述新型钙螯合肽,其特征在于,所述钙螯合肽的分子量为

1157.627Da。

3.权利要求1~2任一所述新型钙螯合肽的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:S1:将罗非鱼骨架进行酶解脱肉,碱洗脱脂,脱钙处理和酸处理后得到罗非鱼骨胶原蛋白;

S2:将S1所得罗非鱼骨胶原蛋白酶解后,灭酶,离心取上清液冻干;

S3:利用制备型反相高效液相色谱进行多级逐级分离纯化后,利用分析型高效液相分离即得到所述钙螯合肽。

4.根据权利要求3所述制备方法,其特征在于,S1中所述酶解脱肉的过程为:将罗非鱼骨架切段,用中性蛋白酶酶解后,去除罗非鱼骨架上的碎肉。

5.根据权利要求3所述制备方法,其特征在于,S1中所述碱洗脱脂的过程为:利用无机碱性溶液清洗脱脂,然后清洗至中性。

6.根据权利要求3所述制备方法,其特征在于,S1中所述脱钙处理的过程为:将碱洗脱脂后罗非鱼骨置于EDTA-2Na溶液中,冷冻,搅拌,清洗至中性。

7.根据权利要求3所述制备方法,其特征在于,S1中所述酸处理的过程为:脱钙后的鱼骨用酸性溶液处理后水洗至中性,即得到罗非鱼骨胶原蛋白。

8.根据权利要求3所述制备方法,其特征在于,S2中选用木瓜蛋白酶进行酶解;

所述木瓜蛋白酶在酶解体系的质量分数为0.3~1%;所述酶解的时间为4~6h;

所述酶解的温度为40~60℃;所述酶解的pH为6.0~7.0,木瓜蛋白酶和罗非鱼骨胶原蛋白的酶底比0.5~1.5%。

9.根据权利要求3所述制备方法,其特征在于,S3中所述制备型高效液相色谱包括2级逐级分离纯化;所述分析型高效液相分离的条件为:进样量为20μL;色谱柱为C18色谱柱;流动相A为含有0.1%的TFA的水溶液,流动相B为含0.1%TFA的乙腈溶液;洗脱速度为1.0mL/min;紫外检测波长为双检测波长:214nm、280nm;洗脱条件为:0~40min:流动相B:5%~

25%,40~45min:流动相B:25%~90%,45~50min:流动相B:90%,50~55min:流动相B:

5%。

10.权利要求1~2任一所述新型钙螯合肽在制备补钙制剂或功能性饮料中的应用。