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专利号: 2019109212997
申请人: 淮阴工学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种威灵仙药材HPLC指纹图谱的检测方法,其特征在于包括以下步骤:(1)对照品溶液的制备:称取有机酸对照品,加甲醇溶解并定容摇匀;

(2)供试品溶液的制备:称取多批次威灵仙药材粉末,分别加纯水,超声提取,过滤,离心后上清液定容,用微孔滤膜滤过,取续滤液,得各批次供试品溶液;

(3)标准指纹图谱的制定:提取对照品溶液及各批次的供试品溶液,进行HPLC检测,记录色谱图,依据所得的各批次威灵仙药材的指纹图谱,制定标准指纹图谱,确定该标准指纹图谱中的指纹峰,选定参照峰;

(4)指纹图谱的质量控制:将待检测的威灵仙药材指纹图谱与上述标准指纹图谱进行比较,计算相似度,识别所具有的共同指纹峰的数量,确定相似度;

所述步骤(1)中有机酸对照品包括:新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异阿魏酸、异绿原酸A、异绿原酸B、异绿原酸C中的一种或多种混合;

所述步骤(2)中威灵仙药材选择不同地区获取的多个批次药材;

所述步骤(2)制备时每批次威灵仙药材粉末质量为2.5~5.0g,纯水体积为20~50ml,超声提取时间为10~60min,离心后上清液定容250ml,微孔滤膜的规格为0.22μm;

所述步骤(3)中,所选的参照峰为异阿魏酸、绿原酸里面的一种,HPLC检测时色谱条件:色谱柱为Venusil XBP C18柱;柱温为24~36℃;检测波长为280nm‑330nm;流动相A为乙腈,流动相B为0.5%醋酸水溶液,总流速为1ml/min;分析时间70分钟;

采用梯度洗脱,具体为0~5min:5%流动相A,其余为流动相B;5~25min:5%~18%流动相A,其余为流动相B;25~30min:18%流动相A,其余为流动相B;30~45min:18%~27%流动相A,其余为流动相B;45~48min:27%流动相A,其余为流动相B;48‑70min:90%流动相A,其余为流动相B。

2.根据权利要求1所述的威灵仙药材HPLC指纹图谱的检测方法,其特征在于:所述检测波长为280nm。