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专利号: 2019109370030
申请人: 南宁学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-02-26
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种牛骨源柠檬酸钙的提取方法,其特征在于,包括如下步骤:S1破碎:将新鲜牛骨洗净后破碎至过50‑80目筛;

S2脱脂:将牛骨置于鼠李糖乳杆菌活化液中,在20‑35℃、100‑200转/min的条件下摇床发酵培养10‑20h,过滤,得牛骨粉;

S3渗透:将牛骨粉置于容器中,用含柠檬酸的水蒸汽喷淋120‑240s;所述含柠檬酸的水蒸汽中柠檬酸质量分数为10‑20%;每100g牛骨粉的喷淋速率为300‑400mL/s;

S4速冻:将经渗透处理的牛骨粉在零下10℃至零下30℃的条件下进行冷冻1‑3h;

S5解冻:将经速冻处理的牛骨粉置于2个大气压,121℃高温高压处理5min,再升至4个大气压处理10min;

S6微波处理:经发解冻后的牛骨粉转入微波仪器中,并向其中加入柠檬酸溶液调节pH为3‑6,经微波处理、过滤后,取滤液加热浓缩,即得柠檬酸钙;

所述鼠李糖乳杆菌活化液的制备方法为:将鼠李糖乳杆菌冻干菌粉采用MRS液体培养基在30‑35℃条件下活化1‑4h后,得悬浮液;将悬浮液倒入含钾溶液静置处理10‑20h,在45‑

55℃下热胁迫处理10‑25min;

7

所述鼠李糖乳杆菌活化液总活菌数为(1.7‑3.7)×10 cfu/mL;所述悬浮液与含钾溶液的体积比为1:(0.2‑0.4);

所述MRS液体培养基配方为:蛋白胨6‑8g,酵母提取物2‑4g,葡萄糖22‑27g,乙酸钠1‑

3g,柠檬酸二铵3‑4g,吐温801‑2mL,MgSO4·7H2O0.1‑0.3g,MnSO4·4H2O0.03‑0.04g,K2HPO42‑4g,琼脂粉12‑16g,水1100‑1300mL;

所述酵母提取物的制备方法为:

(1)将酵母乳与温度为75‑84℃的热水按1:(2‑5)的质量比混合搅拌20‑25min;

(2)将步骤(1)所得物降温至25‑35℃,并将pH值调节到6.5‑7.0,然后加入复合酶,进行水解反应8‑12h;

(3)将步骤(2)得到的水解液加热至75‑85℃,灭活0.5‑2h,然后分离,分离后的液体经浓缩或喷雾干燥后即得所述酵母提取物;

所述复合酶为胰蛋白酶、核酸酶、谷氨酰胺酶组成;所述复合酶的加入量均以其占所述酵母乳中酵母总重量的千分数计算,所述胰蛋白酶的加入量为1‑3‰,所述核酸酶的加入量为1‑3‰,所述谷氨酰胺酶的加入量为10‑15‰;

所述鼠李糖乳杆菌活化液的用量为牛骨粉质量3‑7倍;

所述微波处理是先在600‑800MHz条件下处理200‑300s,再升高频率1800‑2000MHz条件下处理200‑300s,再降低频率为250‑450MHz条件下处理100‑160s;

所述含钾溶液为KCl、硝酸钾、磷酸钾中任意一种;所述含钾溶液中钾的质量分数为5‑

9%。

2.如权利要求1所述牛骨源柠檬酸钙的提取方法,其特征在于,所述升高频率的速率为

1‑2MHz/s。

3.如权利要求1所述牛骨源柠檬酸钙的提取方法,其特征在于,所述降低频率的速率为

2.5‑3.5MHz/s。

4.如权利要求1所述牛骨源柠檬酸钙的提取方法,其特征在于,所述柠檬酸溶液的质量分数为50‑60%。