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专利号: 2019110233157
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种热稳定性提高的玉米赤霉烯酮降解酶突变体,其特征在于,氨基酸序列如SEQ ID NO.4所示。

2.编码权利要求1所述玉米赤霉烯酮降解酶突变体的基因。

3.携带权利要求2所述基因的质粒。

4.如权利要求3所述的质粒,其特征在于,所述质粒包括pET‑22b(+)。

5.一种表达权利要求1所述玉米赤霉烯酮降解酶突变体的细胞。

6.如权利要求5所述的细胞,其特征在于,所述细胞包括大肠杆菌BL21(DE3)。

7.一种提高玉米赤霉烯酮降解酶热稳定性的方法,其特征在于,是将氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示的玉米赤霉烯酮降解酶的第134位的组氨酸His和136位的丝氨酸Ser同时替换成亮氨酸Leu。

8.一种生产玉米赤霉烯酮降解酶的方法,其特征在于,先将权利要求5或6所述的细胞接种于LB培养基活化培养,再将活化后的种子液转接于LB培养基发酵培养。

9.如权利要求8所述的方法,其特征在于,先将权利要求5或6所述的细胞接种于LB培养基中35‑39℃、200‑220rpm培养8‑14h,后将活化后的种子液以1‑10%的接种体积比转接入LB培养基,35‑39℃培养3‑4h至OD值为0.6~0.8,降温至25~30℃,加入终浓度为0.5mM‑1mM的IPTG诱导5‑10h。

10.权利要求1所述玉米赤霉烯酮降解酶突变体在谷物或饲料领域的应用。