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专利号: 2019110382804
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.黑曲霉(Aspergillus niger)YH‑6,保藏于广东省微生物菌种保藏中心,保藏编号:GDMCC No:60793,保藏日期2019年9月27日,地址:广东省广州市先烈中路100号大院59号楼

5楼;邮编:510075。

2.一种利用权利要求1所述黑曲霉YH‑6提高淫羊藿中淫羊藿素含量的应用,其特征在于所述应用为:将黑曲霉YH‑6经发酵培养的发酵液过滤,取滤液,加入淫羊藿,在30–35℃、

150–200r/min的振荡条件下转化24–36h,过滤除去粗酶液,滤饼烘干,即得富含淫羊藿素的淫羊藿。

3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述淫羊藿的加入量以滤液体积计为20–50g/L。

4.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述淫羊藿在加入前需在85℃干燥并粉碎过

80目筛。

5.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述滤液制备方法为:将黑曲霉YH‑6接种于产酶培养基中,于28–30℃、200–250r/min恒温振荡条件下培养2–3d,发酵液过滤,滤液即为糖苷酶粗酶液;所述产酶培养基终浓度组成为:淫羊藿苷1–2g/L,蔗糖10–15g/L,酵母浸粉5–

10g/L,KH2PO4 2g/L,MgSO4 0.5g/L,CaCl2 0.2g/L,溶剂为自来水,pH 6.0。

6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述产酶培养基组成为:淫羊藿苷2g/L,蔗糖

15g/L,酵母浸粉10g/L,KH2PO4 2g/L,MgSO4 0.5g/L,CaCl2 0.2g/L,溶剂为自来水,pH为

6.0。

7.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述滤饼烘干条件为85℃、5–8h。

8.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述黑曲霉YH‑6在发酵前,先经平板培养基活化培养制备孢子,或经过种子培养基扩大培养制备种子液,然后用孢子或种子液以体积浓度5%的量接入产酶培养基进行产酶培养,所述黑曲霉YH‑6发酵培养方法为:(1)活化培养:将黑曲霉YH‑6接种于PDA平板培养基,于28–30℃恒温培养2–3d,获得黑曲霉YH‑6孢子;所述的PDA平板培养基终浓度组成为:马铃薯200g/L,蔗糖20g/L,琼脂20g/L,溶剂为自来水,pH自然;

(2)种子扩大培养:挑取步骤(1)活化培养后黑曲霉YH‑6孢子接种至种子培养基中,于

28–30℃、200–250r/min恒温振荡条件下培养1–2d,得种子液;所述种子培养基组成为:蔗糖

10–15g/L,酵母浸粉5–10g/L,KH2PO4 2g/L,MgSO4 0.5g/L,CaCl2 0.2 g/L,溶剂为自来水,pH 6.0;

(3)产酶培养:用步骤(1)活化培养后黑曲霉YH‑6孢子,或步骤(2)制备的种子液按体积浓度5%的接种量接入产酶培养基,于28–30℃、200–250r/min恒温振荡条件下培养2–3d,获得发酵液;所述产酶培养基终浓度组成为:淫羊藿苷1–2g/L,蔗糖10–15g/L,酵母浸粉5–

10g/L,KH2PO4 2g/L,MgSO4 0.5g/L,CaCl2 0.2g/L,溶剂为自来水,pH 6.0。