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专利号: 2019110384231
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.调控大肠杆菌细胞大小的方法在工业生产3‑羟基丁酸‑乳酸聚合物方面的应用,其特征在于,所述调控大肠杆菌细胞大小的方法具体是:在细胞培养过程中添加诱导剂,调节诱导剂的浓度以调控大肠杆菌细胞大小;所述大肠杆菌中不表达碳储存调节因子,且过表达组氨酸类似物与绿色荧光蛋白;所述不表达包括缺失或沉默;所述诱导剂为无水四环素;

所述碳储存调节因子的氨基酸序列与NCBI上Gene ID: 947176的基因编码的氨基酸序列一致;

所述应用是将含phaA、phaB、phaC和pct基因的质粒转化至E. coli  JM109ΔCsrA pTetR/PTET‑HNS‑GFP的感受态细胞;所述过表达是采用四环素诱导型启动子转录编码组氨酸类似物与绿色荧光蛋白融合蛋白的基因;编码所述融合蛋白的基因连接到pTetR载体进行表达;

所述诱导剂的浓度为100 ng/mL;所述融合蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述大肠杆菌包括大肠杆菌(Escherichia coli)JM109。

3.如权利要求1所述的应用,其特征在于,所述不表达碳储存调节因子是利用同源重组敲除碳储存调节因子。