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专利号: 2019110438513
申请人: 安徽师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2023-08-08
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种卵清蛋白OVA的检测方法,其特征在于,所述检测方法为:

1)将双信号‑双识别印迹电化学传感器在缓冲溶液中进行第一次孵育;

2)将上述双信号‑双识别印迹电化学传感器在缓冲溶液中进行第二次孵育,然后进行电化学检测;

其中,步骤1)中所述双信号‑双识别印迹电化学传感器的制备方法包括:a、在电极载体的表面进行电化学聚合形成聚对氨基苯磺酸膜pABSA以得到pABSA/电极载体;

b、在所述pABSA/电极载体的表面进行电化学聚合形成聚硫堇膜pTH以得到pTH/pABSA/电极载体;

c、将所述pTH/pABSA/电极载体置于混合溶液中进行电化学聚合,然后将电极进行洗脱去除卵清蛋白OVA形成印迹聚合物MIP,以得到MIP/pTH/pABSA/电极载体;

其中,在步骤a)中,所述电化学聚合满足以下条件:采用循环伏安法CV进行,扫描圈数为12‑18圈,聚合电位为‑1.5~+2.5V,扫描速率为80‑120mV/s;所述电化学聚合于pH为6.5‑‑4  ‑4

7.5的PBS溶液中进行,对氨基苯磺酸ABSA的浓度为1×10 ‑3×10 mol/L;

其中,在步骤b)中,所述电化学聚合满足以下条件:采用循环伏安法CV进行,扫描圈数为28‑32圈,聚合电位为‑0.4~+0.4V,扫描速率为80‑120mV/s;所述电化学聚合于pH为4.5‑

5.5的PBS溶液中进行,硫堇TH的浓度为4‑6mmol/L;

其中,在步骤c)中,所述混合溶液中含有卵清蛋白OVA、3‑噻吩硼酸3‑TBA;所述电化学聚合满足以下条件:采用循环伏安法CV进行,扫描圈数为18‑22圈,聚合电位为‑0.2~+

1.2V,扫描速率为120‑130mV/s;所述电化学聚合于pH为7.5‑8.5的PBS溶液中进行,3‑噻吩硼酸3‑TBA的浓度为8‑12mmol/L,卵清蛋白OVA的浓度为0.3‑0.5mmol/L;所述洗脱为:将电极置于pH为0.2‑0.4HCl溶液中浸泡15‑25min;

其中,在步骤a)和步骤b)之后,所述制备方法还包括:将电极通过用去离子水冲洗;

其中,所述电极载体选自玻碳电极GCE、碳纸电极和丝网印刷电极中的一者;

其中,步骤1)第一次孵育的缓冲溶液中含有卵清蛋白OVA,步骤2)第二次孵育的缓冲溶液中含有二茂铁硼酸FcBA。

2.根据权利要求1所述的检测方法,其中,所述第一次孵育、第二次孵育各自独立地满足以下条件:孵育时间为10‑20min。

3.根据权利要求1所述的检测方法,其中,在步骤2)中,所述第二次孵育的缓冲溶液中二茂铁硼酸FcBA的浓度为0.08‑0.12mmol/L。

4.根据权利要求1所述的检测方法,其中,所述第一次孵育、第二次孵育的缓冲溶液的pH为8‑9。

5.根据权利要求1所述的检测方法,其中,在步骤2)中,所述电化学检测采用差分脉冲伏安法DPV进行,电压为‑0.5~+0.5V。