1.一种鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA，其特征在于：所述鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA的蛋白质序列是：

MFDGNYLDPVEGNSTEVGLKSAWFDGRLNGTLALYHIKQDNLAQEAGQVTRNGVKETYYRAAKGATSEGFEVEVSGQITPDWNITAGYSQFSAKDANDADVNTQLPRKMIQSFTTYKLPGKLENITVGGGVNWQSSTYVNAKNPKKVIEKVEQGDYALVNLMARYQITKDFSAQLNINNVFGGSGGSGGSGGSLGYTFQDTQHNNGGKDGELTNGPELQDDLFVGAALGIELTPWLGFEAEYNQVKGDVDGLAAGAEYKQKQINGNFYVTSDLITKNYDSKIKPYVLLGAGHYKYEIPDLSYHNDEEGTLGNAGVGAFWRLNDALSLRTEARGTYN；

用于编码所述鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA的核酸基因全序列是：

CATATGTTCGATGGCAACTACCTGGACCCGGTAGAAGGTAACTCTACTGAAGTTGGTCTCAAATCCGCTTGGTTTGACGGCCGTCTGAACGGTACCCTGGCTCTGTACCACATCAAACAGGACAACCTGGCACAGGAAGCGGGCCAAGTTACCCGTAACGGTGTTAAAGAGACTTACTACCGTGCAGCGAAAGGCGCTACATCCGAAGGTTTTGAAGTTGAAGTATCAGGTCAGATCACTCCAGATTGGAACATCACCGCAGGTTACTCTCAATTTTCTGCTAAGGACGCGAACGATGCGGACGTAAACACTCAGCTTCCGCGTAAAATGATCCAGAGCTTCACTACCTATAAACTGCCTGGTAAACTGGAAAACATCACAGTTGGCGGTGGCGTAAACTGGCAGTCTTCTACCTACGTGAACGCAAAAAACCCGAAAAAAGTAATCGAAAAAGTTGAGCAGGGTGACTACGCTCTGGTAAACCTGATGGCGCGTTACCAGATCACTAAGGACTTTTCTGCACAGCTTAACATTAACAACGTTTTCGGTGGTTCTGGTGGTTCTGGTGGTTCTGGTGGTTCTCTGGGTTACACCTTCCAGGATACTCAGCACAACAACGGCGGTAAAGACGGTGAACTGACCAACGGTCCGGAACTGCAGGACGACCTGTTCGTTGGTGCTGCGCTGGGTATCGAACTGACTCCGTGGCTGGGTTTCGAAGCCGAGTATAACCAGGTTAAGGGTGACGTGGATGGCCTGGCAGCGGGTGCTGAATACAAACAGAAACAGATCAACGGTAACTTCTACGTTACCAGCGACCTGATTACCAAGAACTATGACTCTAAAATCAAACCGTATGTTCTGCTGGGTGCGGGCCACTACAAATACGAAATCCCGGACCTTTCCTATCACAACGACGAGGAAGGCACTCTGGGTAACGCGGGTGTTGGTGCTTTCTGGCGTCTGAACGACGCTCTGTCTCTGCGTACCGAAGCTCGTGGTACCTATAACTAAGGATCC 。

2.一种鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA的制备方法，其特征在于：所述制备方法是：分别获取鲍曼不动杆菌表面蛋白Fhue及表面蛋白OmpA胞外结构域中抗原表位最为丰富的肽段并找到该肽段基因编码序列，优化肽段基因编码序列，并将优化后的肽段基因编码序列用柔性连接肽的编码序列进行连接，形成融合基因；所述鲍曼不动杆菌表面蛋白Fhue及表面蛋白OmpA在NCBI蛋白质数据库中的accession number分别为KMV27515及AJF83030；所述柔性连接肽的序列是ggsggsggsggs；同时在该融合基因的5’引入酶切位点NdeI、3’端引入终止信号TAA和酶切位点BamHI后化学合成全基因序列，记为FhuOmp；

所述FhuOmp的基因全序列是：

CATATGTTCGATGGCAACTACCTGGACCCGGTAGAAGGTAACTCTACTGAAGTTGGTCTCAAATCCGCTTGGTTTGACGGCCGTCTGAACGGTACCCTGGCTCTGTACCACATCAAACAGGACAACCTGGCACAGGAAGCGGGCCAAGTTACCCGTAACGGTGTTAAAGAGACTTACTACCGTGCAGCGAAAGGCGCTACATCCGAAGGTTTTGAAGTTGAAGTATCAGGTCAGATCACTCCAGATTGGAACATCACCGCAGGTTACTCTCAATTTTCTGCTAAGGACGCGAACGATGCGGACGTAAACACTCAGCTTCCGCGTAAAATGATCCAGAGCTTCACTACCTATAAACTGCCTGGTAAACTGGAAAACATCACAGTTGGCGGTGGCGTAAACTGGCAGTCTTCTACCTACGTGAACGCAAAAAACCCGAAAAAAGTAATCGAAAAAGTTGAGCAGGGTGACTACGCTCTGGTAAACCTGATGGCGCGTTACCAGATCACTAAGGACTTTTCTGCACAGCTTAACATTAACAACGTTTTCGGTGGTTCTGGTGGTTCTGGTGGTTCTGGTGGTTCTCTGGGTTACACCTTCCAGGATACTCAGCACAACAACGGCGGTAAAGACGGTGAACTGACCAACGGTCCGGAACTGCAGGACGACCTGTTCGTTGGTGCTGCGCTGGGTATCGAACTGACTCCGTGGCTGGGTTTCGAAGCCGAGTATAACCAGGTTAAGGGTGACGTGGATGGCCTGGCAGCGGGTGCTGAATACAAACAGAAACAGATCAACGGTAACTTCTACGTTACCAGCGACCTGATTACCAAGAACTATGACTCTAAAATCAAACCGTATGTTCTGCTGGGTGCGGGCCACTACAAATACGAAATCCCGGACCTTTCCTATCACAACGACGAGGAAGGCACTCTGGGTAACGCGGGTGTTGGTGCTTTCTGGCGTCTGAACGACGCTCTGTCTCTGCGTACCGAAGCTCGTGGTACCTATAACTAAGGATCC ；

所述FhuOmp基因编码的蛋白质序列为鲍曼不动杆菌表面蛋白Fhue的509‑688 aa及表面蛋白OmpA的31‑173 aa；两段蛋白序列中间以柔性连接肽进行连接；将此基因片段按常规

2+

方法克隆入原核表达载体pET‑28a（+），用IPTG诱导重组大肠杆菌表达，用Ni 亲和层析法纯化重组His‑FhuOmp蛋白；

所述FhuOmp基因编码的蛋白质序列是：

MFDGNYLDPVEGNSTEVGLKSAWFDGRLNGTLALYHIKQDNLAQEAGQVTRNGVKETYYRAAKGATSEGFEVEVSGQITPDWNITAGYSQFSAKDANDADVNTQLPRKMIQSFTTYKLPGKLENITVGGGVNWQSSTYVNAKNPKKVIEKVEQGDYALVNLMARYQITKDFSAQLNINNVFGGSGGSGGSGGSLGYTFQDTQHNNGGKDGELTNGPELQDDLFVGAALGIELTPWLGFEAEYNQVKGDVDGLAAGAEYKQKQINGNFYVTSDLITKNYDSKIKPYVLLGAGHYKYEIPDLSYHNDEEGTLGNAGVGAFWRLNDALSLRTEARGTYN。

3.一种用于制备鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA抗体的方法，其特征在于：

所述方法是：将如权利要求2所述的重组His‑FhuOmp蛋白作为免疫抗原，与弗氏佐剂混合后反复人工免疫健康的新西兰大白兔，抽血进行效价测定，分离高效价重组蛋白抗体并进行纯化，最终获得鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA抗体。

4.一种鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Pilf+ponA，其特征在于：所述鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Pilf+ponA的蛋白质序列是：

MAVKVRTQLAAEYIRSGDLDSAKRSLDQALSVDSRDATANMMMGILLQQEGSKSNLEKAEHYFKRAISSEPDNAQARNNYGTYLYQMERYNDAIEQFRIAGATLGYDQRYQALENLGRIYLKLGNIASAEKTFKQALLANRDSYISMLELAEIFYLQQEAAAAKEAAAAKGSIEAIVGGYNFYQSKFNRALQGWRQPGSTIKPFLYALALERGMTPYSMVNDSPITIGKWTPKNSDGRYLGMIPLRRALYLSRNTVSVRLLQTVGIERTRQLFMDFGLQEDQIPRNYTIALGTPQVLPIQMATGYATFANGGYRVQPHFIQRIEDAYGKVIYEAKPEY；

用于编码所述鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Pilf+ponA的核酸基因全序列是：

CATATGGCGGTTAAGGTACGCACTCAACTGGCGGCTGAATATATCCGTTCAGGTGATCTGGACTCCGCGAAACGCTCCCTGGACCAGGCCCTGAGCGTTGACTCTCGTGACGCGACAGCAAACATGATGATGGGCATCCTGCTGCAGCAGGAGGGCTCTAAATCTAACCTGGAGAAAGCGGAGCACTACTTCAAACGTGCTATCAGTTCTGAACCGGATAACGCTCAGGCGCGCAACAACTATGGTACCTATCTGTACCAGATGGAACGTTATAACGACGCGATTGAACAGTTTCGTATCGCAGGTGCGACCCTGGGTTATGATCAGCGTTATCAGGCGCTGGAAAACCTGGGCCGCATCTACCTGAAGCTGGGTAACATCGCCAGCGCTGAAAAAACTTTCAAGCAGGCACTGCTGGCGAACCGTGACTCCTACATCTCTATGCTGGAGCTGGCTGAAATCTTTTACCTGCAGCAGGAAGCTGCTGCTGCTAAAGAAGCTGCTGCTGCTAAAGGCTCTATCGAAGCTATCGTAGGTGGTTACAACTTCTACCAGTCCAAGTTTAACCGTGCGCTCCAGGGCTGGCGCCAGCCGGGCTCTACCATTAAACCTTTCCTGTACGCTCTGGCTCTGGAACGTGGCATGACCCCGTACAGCATGGTAAACGATTCTCCGATCACTATTGGTAAATGGACCCCAAAAAATTCTGACGGCCGTTACCTGGGTATGATCCCGCTGCGTCGCGCTCTGTACCTGTCCCGTAACACTGTATCCGTTCGTCTGCTGCAGACTGTTGGCATCGAACGTACCCGCCAACTGTTTATGGATTTCGGTCTGCAGGAAGACCAGATTCCACGTAACTACACTATCGCTCTGGGCACTCCGCAGGTACTGCCGATCCAGATGGCTACCGGCTACGCTACTTTCGCTAATGGCGGCTACCGTGTTCAGCCACATTTCATCCAGCGTATCGAAGACGCGTATGGTAAAGTAATTTACGAAGCTAAACCGGAATATAAGGATCC。

5.一种鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Pilf+ponA的制备方法，其特征在于：所述制备方法是：分别获取鲍曼不动杆菌表面蛋白Pilf及表面蛋白ponA胞外结构域中抗原表位最为丰富的肽段并找到该肽段基因编码序列，优化该肽段基因编码序列，并将此二段序列用刚性连接肽的编码序列进行连接，形成融合基因；所述鲍曼不动杆菌表面蛋白Pilf及表面蛋白ponA在NCBI蛋白质数据库中的accession number分别为AJF80497及ADX05080；所述刚性连接肽的序列是eaaakeaaak；同时在该融合基因的5’引入酶切位点NdeI、3’端引入终止信号TAA和酶切位点BamHI后化学合成全基因序列，记为PilPon；

所述PilPon基因全序列是：

CATATGGCGGTTAAGGTACGCACTCAACTGGCGGCTGAATATATCCGTTCAGGTGATCTGGACTCCGCGAAACGCTCCCTGGACCAGGCCCTGAGCGTTGACTCTCGTGACGCGACAGCAAACATGATGATGGGCATCCTGCTGCAGCAGGAGGGCTCTAAATCTAACCTGGAGAAAGCGGAGCACTACTTCAAACGTGCTATCAGTTCTGAACCGGATAACGCTCAGGCGCGCAACAACTATGGTACCTATCTGTACCAGATGGAACGTTATAACGACGCGATTGAACAGTTTCGTATCGCAGGTGCGACCCTGGGTTATGATCAGCGTTATCAGGCGCTGGAAAACCTGGGCCGCATCTACCTGAAGCTGGGTAACATCGCCAGCGCTGAAAAAACTTTCAAGCAGGCACTGCTGGCGAACCGTGACTCCTACATCTCTATGCTGGAGCTGGCTGAAATCTTTTACCTGCAGCAGGAAGCTGCTGCTGCTAAAGAAGCTGCTGCTGCTAAAGGCTCTATCGAAGCTATCGTAGGTGGTTACAACTTCTACCAGTCCAAGTTTAACCGTGCGCTCCAGGGCTGGCGCCAGCCGGGCTCTACCATTAAACCTTTCCTGTACGCTCTGGCTCTGGAACGTGGCATGACCCCGTACAGCATGGTAAACGATTCTCCGATCACTATTGGTAAATGGACCCCAAAAAATTCTGACGGCCGTTACCTGGGTATGATCCCGCTGCGTCGCGCTCTGTACCTGTCCCGTAACACTGTATCCGTTCGTCTGCTGCAGACTGTTGGCATCGAACGTACCCGCCAACTGTTTATGGATTTCGGTCTGCAGGAAGACCAGATTCCACGTAACTACACTATCGCTCTGGGCACTCCGCAGGTACTGCCGATCCAGATGGCTACCGGCTACGCTACTTTCGCTAATGGCGGCTACCGTGTTCAGCCACATTTCATCCAGCGTATCGAAGACGCGTATGGTAAAGTAATTTACGAAGCTAAACCGGAATATAAGGATCC ;所述PilPon编码的蛋白质序列是：

MAVKVRTQLAAEYIRSGDLDSAKRSLDQALSVDSRDATANMMMGILLQQEGSKSNLEKAEHYFKRAISSEPDNAQARNNYGTYLYQMERYNDAIEQFRIAGATLGYDQRYQALENLGRIYLKLGNIASAEKTFKQALLANRDSYISMLELAEIFYLQQEAAAAKEAAAAKGSIEAIVGGYNFYQSKFNRALQGWRQPGSTIKPFLYALALERGMTPYSMVNDSPITIGKWTPKNSDGRYLGMIPLRRALYLSRNTVSVRLLQTVGIERTRQLFMDFGLQEDQIPRNYTIALGTPQVLPIQMATGYATFANGGYRVQPHFIQRIEDAYGKVIYEAKPEY；

所述PilPon基因编码的蛋白质序列是鲍曼不动杆菌表面蛋白Pilf的28‑184 aa及表面蛋白ponA的406‑572 aa，两个蛋白序列中间以刚性连接肽进行连接；将此基因片段按常规方法克隆入原核表达载体pET‑28a（+），用IPTG诱导重组大肠杆菌表达，用Ni2+亲和层析法纯化重组His‑PilPon蛋白。

6.一种用于制备鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Pilf+ponA抗体的方法，其特征在于：

所述的方法是将如权利要求5所述的重组His‑PilPon蛋白作为免疫抗原，与弗氏佐剂混合后反复人工免疫健康的新西兰大白兔，抽血进行效价测定，分离高效价重组蛋白抗体并进行纯化，最终获得鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Pilf+ponA抗体。

7.一种基于多重表位融合抗原的鲍曼不动杆菌感染快速检测卡，其特征在于：所述基于多重表位融合抗原的鲍曼不动杆菌感染快速检测卡包括包被有如权利要求1所述的鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA抗体的乳胶微球标记物以及包被有如权利要求4所述的鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Pilf+ponA抗体的硝酸纤维素膜。

8.用于制备如权利要求7所述的基于多重表位融合抗原的鲍曼不动杆菌感染快速检测卡的方法，其特征在于：所述方法包括以下步骤：

1）制备鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA抗体以及鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Pilf+ponA抗体；

2）制备鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA抗体的乳胶微球标记物：

2.1）乳胶微球的活化

取浓度为10%的彩色羧基化聚苯乙烯乳胶微球溶液1mL，加入9mL MES缓冲液后混匀，加入NHS以及EDC，至二者的终浓度均为1mg/mL，在室温下缓慢混匀30分钟，孵育结束后19000g离心20分钟，去上清，沉淀用10mL硼砂缓冲液重悬，振荡，超声处理后即成活化后的乳胶微球；所述MES缓冲液中组分及含量是：0.1mol/L MES，所述MES缓冲液的pH=8.5；所述硼砂缓冲液中组分含量为0.1mol/L Na2B4O7，所述硼砂缓冲液的pH=8.5；所述彩色羧基化聚苯乙烯乳胶微球的粒径是100 nm；

2.2）乳胶微球标记物的制备：

用硼砂缓冲液将步骤1）所得的鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA抗体稀释成

1 mg/mL；取10mL鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA抗体加入10mL活化乳胶微球，缓慢混匀30分钟后19000g离心10分钟，去上清；沉淀用10mL含有1%酪蛋白的硼砂缓冲液重悬，经超声粉碎后重复离心1次，去上清；沉淀同法重悬，经超声粉碎后重复离心1次，去上清；沉淀用10mL含有1%酪蛋白的硼砂缓冲液重悬，即为鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA抗体的乳胶微球标记物；所述硼砂缓冲液中组分含量为0.1mol/L Na2B4O7，所述硼砂缓冲液的pH=8.5；

3）结合垫的制备：

向聚酯纤维材质的结合垫上喷涂步骤2）所得到的鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Fhue+OmpA抗体的乳胶微球标记物，每平方厘米聚酯纤维膜的喷涂量为10µL乳胶微球标记物；喷涂完后在相对湿度不超过30%的环境中在37℃下烘干，25℃密封干燥保存；

4）抗体固相硝酸纤维素膜的制备：

用硼砂缓冲液将步骤1）所得的鲍曼不动杆菌多重表位融合抗原Pilf+ponA抗体稀释成

1.5 mg/mL后用喷膜仪包被到硝酸纤维素膜上的检测线位置作为检测线捕获抗体，包被参数为1µL/cm；将羊抗兔IgG喷涂到硝酸纤维素膜上的质控线位置作为控制线捕获抗体，浓度为1mg/mL，包被参数为1µL/cm；包被完后将该硝酸纤维素膜放在相对湿度不超过30%的环境中，于37℃下烘干，25℃密封干燥保存；所述硼砂缓冲液中组分含量为0.1mol/L Na2B4O7，所述硼砂缓冲液的pH=8.5；

5）样品垫的制备：

取玻璃纤维素膜一张，将其在样品垫处理液中浸泡至少3 h以上，再置于生物安全柜内

37℃通风干燥后，剪裁成所需的规格，25℃密封干燥保存；至此制得样品垫；

所述样品垫处理液中各组分含量分别是：0.01mol/L Na2B4O7、2 g/L氯化钠、20 g/L 酪蛋白、10 ml/L 吐温‑20以及10 ml/L 消泡剂S‑17；所述样品垫处理液的pH=8.5；

6）检测卡的组装：

分别将吸水滤纸材质的吸水垫、抗体固相硝酸纤维素膜、结合垫、样品垫、依次粘贴在PVC底板上，硝酸纤维素膜上所述质控线靠近吸水垫端，所述检测线靠近样品垫端，再切割成一定宽度的检测卡，密封包装，干燥低温保存；至此制得基于多重表位融合抗原的鲍曼不动杆菌感染快速检测卡。