1.一种酶法制备罗汉果苷IV和苷V的方法,其特征在于:具体是利用酶催化罗汉果苷IIE、III生成罗汉果苷IV、V,所述酶来源自UDP葡萄糖基转移酶UGT032,核苷酸DNA序列如SEQ NO.1所示,氨基酸PRT序列如SEQ No.2所示。
2.根据权利要求1所述的酶法制备罗汉果苷IV和苷V的方法,其特征在于:先制备粗酶液,再用粗酶液分别催化罗汉果苷IIE、III生成罗汉果苷IV、V;
所述粗酶液的制备方法具体是,将酶基因UGT032构建至pET22b上,重组质粒命名为pET22b-UGT032;
再将重组质粒转化至大肠杆菌感受态细胞Top10中克隆质粒,摇瓶培养收集菌体,提质粒并在-80℃中保存;
将提取的质粒转化至大肠杆菌表达宿主BL21p中诱导、表达,收集菌体,按菌体重量的4倍加入破菌液,利用均质机破裂细胞制得粗酶液。
3.根据权利要求2所述的酶法制备罗汉果苷IV和苷V的方法,其特征在于:用酶催化罗汉果苷IIE、III生成罗汉果苷IV、V的方法具体是,在三口瓶中加入底物罗汉果苷IIE或III,加入粗酶液,尿苷二磷酸,蔗糖合成酶,继续加入pH=7.5的磷酸缓冲溶液,搅拌, 35℃水浴;
水浴反应8-12h后,即可用HPLC检测苷IIE或III的转化率。