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专利号: 2019113558470
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种鉴定Lager和/或Ale型啤酒酵母的方法,其特征在于,所述方法是以SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示的引物对待筛选的啤酒酵母或其基因组DNA进行扩增,能够获得特异性片段的为Lager型啤酒酵母,不能获得特异性片段的为Ale型啤酒酵母。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,在所述特异性片段的核苷酸序列长度为

757bp。

3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,所述特应性片段的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示。

4.根据权利要求1~3任一所述的方法,其特征在于,用于扩增的PCR反应条件为:95℃预变性3min;95℃变性15s,63℃退火15s,72℃延伸15s,共35个循环;72℃延伸5min,降温至

4℃保存。

5.根据权利要求1~3任一所述的方法,其特征在于,所述PCR反应的反应体系含有2×Rapid Taq Master Mix、SEQ ID NO.3所示的引物、SEQ ID NO.4所示的引物、待测酵母DNA、ddH2O,上述各组分的体积比为12.5:1:1:1:9.5。

6.根据权利要求1~5任一所述的方法,其特征在于,应用琼脂糖凝胶电泳检测扩增后的特应性片段,凝胶图谱显示含有特异性标记条带的为Lager型啤酒酵母,无特异性标记条带的为Ale型啤酒酵母。

7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,还对扩增后的特异性片段进行回收和测序。

8.根据权利要求1~7任一所述的方法,其特征在于,所述Lager型啤酒酵母包括啤酒酵母S23、啤酒酵母CA14、啤酒酵母W-34/70、啤酒酵母BF16、啤酒酵母CA30、啤酒酵母S189、啤酒酵母CA24、啤酒酵母CA25、啤酒酵母CA13、啤酒酵母CA21、啤酒酵母M76、啤酒酵母CA22、啤酒酵母Diamond、啤酒酵母CA36、啤酒酵母CA12或啤酒酵母US-05;所述Ale型啤酒酵母包括啤酒酵母T-58、啤酒酵母WB-06、啤酒酵母M29、啤酒酵母Munich Classic、啤酒酵母WEISS、啤酒酵母BRY-97或啤酒酵母S33。

9.SEQ ID NO.2所示基因在筛选Lager和/或Ale型啤酒酵母中的应用。