1.一种L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,由序列如SEQ ID NO.3所示氨基酸经定点突变而来,所述突变的位点为下列中的一个或多个:(1)第304位、(2)第75位、(3)第274位、(4)第
167位。
2.如权利要求1所述的L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,其特征在于所述突变体由序列如SEQ ID NO.3所示氨基酸经下列之一或多个位点突变而得:(1)第304位甘氨酸G突变为组氨酸H、异亮氨酸I、酪氨酸Y或色氨酸W,(2)第75位甘氨酸G突变为赖氨酸K、蛋氨酸M、苯丙氨酸F或脯氨酸P,(3)第274位丙氨酸G突变为丝氨酸S、苏氨酸T、酪氨酸Y、缬氨酸V或半胱氨酸C,(4)167位丙氨酸A突变为天冬酰胺N、天冬氨酸D或精氨酸R。
3.如权利要求1所述的L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,其特征在于所述突变体由序列如SEQ ID NO.3所示氨基酸经下列之一或多个位点突变而得:(1)第304位甘氨酸G突变为酪氨酸Y、(2)第75位甘氨酸G突变为苯丙氨酸F、(3)第274位丙氨酸G突半胱氨酸变C、(4)167位丙氨酸A突变为精氨酸R。
4.如权利要求3所述的L-阿拉伯糖差向异构酶突变体,其特征在于所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体序列如SEQ ID NO.7所示。
5.权利要求1~4之一所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体在催化D-半乳糖异构化制备D-塔格糖中的应用。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述应用为:以含L-阿拉伯糖差向异构酶编码基因的重组基因工程菌经发酵培养获得的湿菌体或湿菌体经超声破碎后获得的上清液或菌体细胞经固定化获得的固定化酶制剂作为催化剂,以D-半乳糖为底物,在Mn2+和/或Co2+存在下,在6.0~7.0的KH2PO4-NaOH缓冲液中,65~80℃温度下反应,反应结束后,反应液分离纯化,获得D-塔格糖。
7.如权利要求6所述的应用,其特征在于所述L-阿拉伯糖差向异构酶突变体编码基因序列如SEQ ID NO.8所示。