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专利号: 2019114066401
申请人: 金陵科技学院
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 有机化学〔2〕
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白,其特征在于,其该蛋白从N端-C端依次由人溶菌酶的氨基酸编码序列、连接肽的氨基酸编码序列和抗菌肽的氨基酸编码序列连接所得。

2.根据权利要求1所述的重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白,其特征在于,所述人溶酶菌的氨基酸编码序列如SEQ ID NO.1所示。

3.根据权利要求1所述的重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白,其特征在于,所述连接肽的氨基酸编码序列如SEQ ID NO.2所示。

4.根据权利要求1所述的重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白,其特征在于,所述抗菌肽的氨基酸编码序列如SEQ ID NO.3所示。

5.根据权利要求1所述的重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白,其特征在于,所述重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白的氨基酸编码序列如SEQ ID NO.4所示。

6.权利要求1所述的重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白的编码基因其特征在于,所述编码基因的核苷酸序列如SEQ ID NO.5所示。

7.权利要求1所述的重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白的制备方法,其特征在于,包括如下步骤:(1)将重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白的碱基序列克隆至肠杆菌表达载体pET30a的NdeI和HindIII酶切位点之间,构建重组大肠杆菌表达载体;

(2)将步骤(1)构建的重组大肠杆菌表达载体转化至大肠杆菌宿主细胞BL21中,IPTG诱导表达后,离心收集菌体,超声波裂解,离心收集包涵体沉淀;

(3)将步骤(2)收集的包涵体沉淀进行纯化,即得到重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白。

8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,步骤(3)中,所述的纯化为将包涵体沉淀用洗涤液洗涤,收集二次包涵体沉淀,再进行抽提,离心,收集上清液;利用QAE层析柱、蛋白纯化仪对收集的上清液进行纯化。

9.权利要求1所述的重组溶菌酶抗菌肽融合蛋白在抑制革兰氏阳性菌和/或革兰氏阴性菌中的应用。