1.一种母猪初乳中PEDV特异性SIgA抗体的ELISA检测试剂盒，包括包被酶标板，其特征在于：所述包被酶标板以PEDV病毒粒子作为包被抗原；试剂盒还包括包被液、封闭液、SC兔多抗、HRP标记山羊抗兔IgG、洗涤液、稀释液、底物液和终止液；所述PEDV病毒粒子由PEDV病毒液放置在紫外灯下灭活一个小时制备；

所述SC兔多抗按以下方法制备：

<1>猪SC片段基因的扩增及蛋白表达载体的构建

从母猪初乳中对猪SC基因的110‑374位氨基酸序列进行扩增，得到PCR产物；将PCR产物进行胶回收并克隆至pMD‑18T载体上，与原核表达载体pET‑32a进行双酶切，并对酶切产物进行回收和纯化后，通过T4连接酶在16℃的条件下进行酶切产物的连接，得到重组表达载体pET‑32a‑SC，并对其进行测序及双酶切鉴定；所述氨基酸序列为序列表SEQ.ID.No.3所编译；

<2>重组质粒的诱导表达及检测

将双酶切和测序结果均正确的重组质粒转化至BL21(DE3)pLysS  Chemically Competent Cell中并涂板培养，然后放置于37℃水平摇床进行扩增，待扩增的菌液OD值为

0.6时，按照加入IPTG继续在37℃水平摇床诱导5h；将诱导好的菌液经离心，超声破碎等处理后进行SDS‑PAGE电泳，以检测重组SC蛋白的表达情况和反应原性。

2.根据权利要求1所述的ELISA检测试剂盒，其特征在于步骤<1>中所述扩增为先进行RT‑PCR扩增，然后进行PCR扩增；

所述RT‑PCR扩增体系共12.5µL，其中：TaKaRa：5×Buffer 2.5µL，TaKaRa：dNTP mix 

2.5mmol/µL，1µL，TaKaRa：M‑MLV Reverse Transcriptase 200U/µL，0.25µL，Vazyme：RNasin酶抑制剂 40U/µL，0.25 µL，下游引物或Oligo dT 0.5µL，RNA 8µL，42℃作用1h，得到cDNA；

所述PCR扩增反应体系共25µL，其中：ddH2O 8.5µL，上游引物 0.5µL，下游引物 0.5µL，PRIMER STAR酶 12.5µL，cDNA 3µL；扩增条件为：94℃预变性5min；进入循环：94℃变性40s，

62℃退火40s，72℃延伸50s，34个循环；72℃再延伸10min后，4℃保存，得到目的片段；

其中，所用SC片段引物为SC‑F和SC‑R，它们分别具有序列表SEQ.ID.No.1和SEQ.ID.No.2的碱基序列。

3.根据权利要求1所述的ELISA检测试剂盒，其特征在于步骤<1>中所述双酶切体系共

100µL，其中：质粒 33µL，内切酶EcoRⅠ 7µL，内切酶Hind Ⅲ 7µL，10×Buffer 10µL，ddH2O 

43µL，37℃水浴锅过夜双酶切。

4.根据权利要求1所述的ELISA检测试剂盒，其特征在于步骤<1>中所述酶切产物的连接体系共10µL，其中：T4 DNA连接酶 1µL，双酶切重组质粒所回收的目的片段 7µL，双酶切pET‑32a载体所回收的目的片段 1µL，T4 DNA连接酶Buffer 1µL；各组分混匀后，离心，16℃条件下连接至少8h。

5.一种使用权利要求1所述ELISA检测试剂盒的母猪初乳中PEDV特异性SIgA抗体的ELISA检测方法，其特征在于包括以下步骤：抗原包被：将抗原PEDV病毒粒子和包被液加入酶标板，进行包被；

封闭：加入含BSA的PBS作为封闭液进行封闭，弃去封闭液并用PBST洗去残余封闭液；

加抗体：先加入初乳，37℃孵育1h，反应后用PBST洗涤；

再加入SC兔多抗，37℃孵育1h，反应后用PBST洗涤；

然后加入HRP标记山羊抗兔IgG，37℃孵育1h，反应后用PBST洗涤；

显色和测定：加底物，避光显色后加入终止液，在酶标仪450nm波长下进行读数。

6.根据权利要求5所述的ELISA检测方法，其特征在于：所述包被抗原中，每孔包被的5

PEDV病毒粒子约为10 ，4℃的条件下至少包被12h；所述初乳按以下处理：收集母猪的初乳，在4 8℃的条件下3000rpm/min离心30分钟，弃掉上层脂肪和下层沉淀，取中间层乳清；所述~封闭中，加入含体积百分比1%BSA的PBS作为封闭液，在37℃的条件下封闭2h；所述显色和测定中，加入TMB，在37℃的条件下避光反应20min后，加入终止液。

7.根据权利要求6所述的ELISA检测方法，其特征在于：所述初乳的稀释度为1：10，加入量为100µL；所述SC兔多抗的稀释度为1：1000，加入量为100µL；所述HRP标记山羊抗兔IgG的稀释度为1：2000，加入量为100µL。