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专利号: 2020100133687
申请人: 江苏师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种筛选抑制黄曲霉致病或防治黄曲霉污染的药物的方法,其特征在于所述方法包括检测黄曲霉致病基因fadA水平或FadA蛋白的表达水平。

2.根据权利要求1所述的方法,其特在于,所述方法具体包括:

S1:构建检测组黄曲霉菌培养体系和对照组黄曲霉菌培养体系,其中,检测组中添加待筛选药物;

S2:将检测组和对照组在相同条件下培养一段时间后,对比检测组和对照组中黄曲霉菌内的fadA基因或FadA蛋白的表达水平,若检测组中黄曲霉菌内的fadA基因或FadA蛋白的表达水平在一定程度上低于对照组,则待筛选药物为潜在抑制黄曲霉致病性药物。

3.根据权利要求2所述的方法,其特在于,所述步骤S2中,通过荧光定量qPCR或Northern blot杂交分析检测检测组和对照组中的黄曲霉菌内fadA基因mRNA表达水平。

4.根据权利要求2所述的方法,其特在于,所述步骤S2中,通过Western blot免疫印迹杂交分析或酶联免疫吸附法分析检测检测组和对照组中的黄曲霉菌内FadA蛋白表达水平。

5.根据权利要求4所述的方法,其特在于,用于分析检测FadA蛋白表达水平的相应抗体是针对FadA蛋白或蛋白片段的抗体或是在FadA蛋白C端与小分子多肽标签进行融合表达后针对小分子多肽标签的抗体。

6.根据权利要求5所述的方法,其特在于,所述小分子多肽标签为GFP标签、RFP标签、His标签、HA标签、Flag标签或GST标签。

7.根据权利要求2所述的方法,其特在于,还包括步骤S3:使用筛选出的所述潜在抑制黄曲霉致病性药物进行黄曲霉生长、产孢、产毒抑制测试或黄曲霉种子侵染抑制测试确认所述潜在抑制黄曲霉致病性药物是否为抑制黄曲霉致病性药物。