1.一种双光子荧光探针,其特征在于,所述荧光探针结构如下式所示:
2.权利要求1所述双光子荧光探针的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:将羟基四苯乙烯与N-Boc-溴乙胺反应,之后脱去Boc,加入S-甲基异硫氨基脲氢碘酸盐生成产物,即为所述双光子荧光探针。
3.如权利要求2所述双光子荧光探针的制备方法,其特征在于,所述制备方法反应过程如下:
4.如权利要求3所述双光子荧光探针的制备方法,其特征在于,所述制备方法步骤如下:(1)向羟基四苯乙烯与N-Boc-溴乙胺溶剂体系中加入碳酸钾和18-冠醚-6,加热回流得到化合物1;
(2)化合物1脱去Boc得到化合物2;
(3)向化合物2的溶剂体系中加入S-甲基异硫氨基脲氢碘酸盐及三乙胺得到检测甲醛的荧光探针。
5.如权利要求4所述双光子荧光探针的制备方法,其特征在于,所述步骤(1)的具体步骤如下:将羟基四苯乙烯与N-Boc-溴乙胺溶解于乙腈中,加入碳酸钾和18-冠醚-6,加热回流10~14h,蒸干溶剂后通过色谱柱洗脱分离得到化合物1;
优选的,所述洗脱剂为二氯甲烷与石油醚的混合溶液,其体积比为V二氯甲烷:V石油醚=1-5:
1;
优选的,所述羟基四苯乙烯、N-Boc-溴乙胺、碳酸钾、18-冠醚-6及乙腈的用量比为
0.14-0.17g:0.14-0.17mL:0.11-0.14g:0.10-0.13g:4-5mL。
6.如权利要求4所述双光子荧光探针的制备方法,其特征在于,所述步骤(2)的具体步骤如下:将化合物1溶于二氯甲烷中,搅拌下滴入三氟乙酸反应1.5~2.5h;
优选的,所述化合物1、二氯甲烷及三氟乙酸的比为0.16-0.20g:4-5mL:1.2-1.5mL。
7.如权利要求4所述双光子荧光探针的制备方法,其特征在于,所述步骤(3)的具体操作如下:将化合物2、S-甲基异硫氨基脲氢碘酸盐溶于无水乙醇,并加入三乙胺,之后75~85℃回流3.5~4.5h,旋干,残余物通过色谱柱纯化,得到所述双光子荧光探针。
8.权利要求1所述双光子荧光探针在甲醛检测领域的应用。
9.如权利要求8所述双光子荧光探针在甲醛检测领域的应用,其特征在于,所述甲醛检测包括活体样品中的甲醛检测,包括具有生命的个体,活体组织及细胞等。
10.一种样品中甲醛的检测方法,其特征在于,所述检测方法包括如下步骤:向待测样品中加入所述双光子荧光探针的缓冲液进行孵育,孵育结束后洗去多余的探针,通过显微成像拍摄并测量待测样品中的荧光强度。