1.一种同时检测烟叶中13种物质含量的方法,其特征在于,所述方法包括以下步骤:(1)样品预处理:将烟叶冷冻干燥磨粉,得到预处理的烟叶;
(2)样品提取:取预处理的烟叶置于收集容器中,加入萃取剂,经过离心,收集上清液,二次提取,经滤膜过滤后的滤液作为样品溶液;
(3)用双柱串联‑液相色谱‑质谱法对样品进行分离检测;
(4)采用样品的峰面积和标准曲线进行定量分析,计算得到烟叶中13种物质含量;
其中,所述13种物质为:尼古丁(NT)、3‑羟基可替宁(HC)、可替宁(CT)、降烟碱(NNT)、安那他品(AT)、假木贼碱(AB)、氨基酮[4‑(甲基氨基)‑1‑(3‑吡啶基)1‑丁酮](AK)、6‑羟基烟碱(6‑HN)、2‑羟基烟碱(2‑HN)、N‑亚硝基去甲基烟碱(NNN)、4‑(N‑甲基亚硝胺基)‑1‑(3‑吡啶基)‑1‑丁酮(NNK)、N‑亚硝基新烟草碱(NAT)、N‑亚硝基假木贼碱(NAB);
所述萃取剂包括甲酸铵、乙腈和水,重量体积比例为1.0‑1.3g:1.0‑1.2L:0.8‑1.1L;
所述双柱串联‑液相色谱‑质谱法中,色谱条件为:
色谱柱:以Waters Xbridge Amide 3.5μm,2.1×100mm在前、Waters Atlantis T33μm,
2.1×50mm在后的顺序进行串联;柱温:30℃;进样器温度:6℃;流速:0.6mL/min;进样量1~
10μL;分离时间5.5min;流动相:A为100mM甲酸铵水溶液,B为乙腈;梯度洗脱条件为:第0~
3min,5%~98%流动相B;第3~4min,98%流动相B;第4~4.1min,98%~5%流动相B;第
4.1~5.5min,5%流动相B。
2.根据权利要求1所述的同时检测烟叶中13种物质含量的方法,其特征在于,步骤(1)中,在‑50~‑80℃真空冷冻干燥1~3h,磨粉后过40目筛。
3.根据权利要求1所述的同时检测烟叶中13种物质含量的方法,其特征在于,所述双柱串联‑液相色谱‑质谱法中,质谱条件为:ESI正离子电离模式;涡轮喷射电压4500eV;离子源温度500℃;气帘气10psi;碰撞气(CAD)12psi;雾化气(GS1)60psi,加热器气体(GS2)70psi;多反应监测(MRM)。
4.根据权利要求1所述的同时检测烟叶中13种物质含量的方法,其特征在于,步骤(2)中,采用孔径为0.45μm的PTFE膜进行过滤。