1.一种重组乳酸乳球菌,其特征在于,表达并分泌CRAMP蛋白;所述CRAMP蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。
2.根据权利要求1所述的重组乳酸乳球菌,其特征在于,以乳酸乳球菌NZ9000为宿主。
3.根据权利要求1或2所述的重组乳酸乳球菌,其特征在于,以pMG36e或pNZ8148为载体。
4.根据权利要求1或2所述的重组乳酸乳球菌,其特征在于,以Usp45信号肽促进CRAMP蛋白的表达;所述Usp45信号肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
5.根据权利要求3所述的重组乳酸乳球菌,其特征在于,以Usp45信号肽促进CRAMP蛋白的表达;所述Usp45信号肽的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。
6.一种构建权利要求1~5任一所述重组乳酸乳球菌的方法,其特征在于,将编码SEQ ID NO.1所示CRAMP蛋白的基因与载体连接,再转化至乳酸乳球菌细胞中;所述载体为pMG36e或pNZ8148。
7.一种组合物,其特征在于,含有权利要求1~5任一所述的重组乳酸乳球菌;所述重组
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乳酸乳球菌的含量≥1×10CFU/mL或1×10CFU/g。
8.一种口服疫苗,其特征在于,含有权利要求1~5任一所述的重组乳酸乳球菌或其全培养物;所述全培养物按如下步骤制备:将所述重组乳酸乳球菌接种于GM17液体培养基静置培养过夜,以一定比例转接于GM17液体培养基,继续培养至细菌进入对数生长期,全培养物直接作为口服疫苗。
9.根据权利要求8所述的口服疫苗,其特征在于,所述静置培养的温度为28~30℃。
10.根据权利要求8所述的口服疫苗,其特征在于,所述转接是将所述的重组乳酸乳球菌以体积比1:100的比例接种于GM17液体培养基。
11.根据权利要求8所述的口服疫苗,其特征在于,所述对数生长期的细菌培养液的OD值为0.4~0.6。
12.权利要求1~5任一所述的重组乳酸乳球菌在制备可引入肠道的功能性食品或药物中的应用,其特征在于,具有如下至少一种功能:(a)抑制肠道炎症;
(b)重塑肠黏膜屏障;
(c)改善肠黏膜通透性;
(d)预防或治疗肠道炎症以及肠道炎症引起的疾病;
(e)降低炎症因子IL‑6、IL‑1β、TNF‑α水平。
13.权利要求1~5任一所述的重组乳酸乳球菌在制备发酵食品中的应用。