1.一种siRNA纳米胶囊,其特征在于,包括siRNA以及包封所述siRNA的壳,所述siRNA与所述壳通过静电结合连接;
所述壳主要由单体A和单体B聚合得到,在所述壳外还连接有靶向配体;
所述单体A能够与所述siRNA通过静电结合,包括一端带有双键的分子;
所述单体B包括用于增加肿瘤微环境敏感性的分子;
所述单体A为胍基丙烯酸酯;
所述用于增加肿瘤微环境敏感性的分子为双胱胺丙烯酰胺;
所述单体B还包括用于连接靶向配体的分子;
所述用于连接靶向配体的分子一端与用于增加肿瘤微环境敏感性的分子相连,另一端连接有靶向配体,所述用于连接靶向配体的分子为丙烯酸酯聚乙二醇琥珀酰羧甲酯。
2.根据权利要求1所述的siRNA纳米胶囊,其特征在于,所述靶向配体包括Angiopep‑2、RGD肽、apolipoprotein E或transferrin。
3.根据权利要求2所述的siRNA纳米胶囊,其特征在于,所述靶向配体为Angiopep‑2。
4.权利要求1‑3任一项所述的siRNA纳米胶囊在制备治疗肿瘤的药物中的应用;
所述肿瘤为胶质母细胞瘤、非小细胞肺癌或宫颈癌。
5.权利要求1‑3任一项所述的siRNA纳米胶囊的制备方法,其特征在于,包括使与siRNA静电结合的单体A与单体B发生聚合反应,得到壳,再在所述壳上连接靶向配体,得到所述siRNA纳米胶囊;
所述单体A包括一端带有双键的分子;
所述单体B包括用于增加肿瘤微环境敏感性的分子以及用于连接靶向配体的分子。
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,将siRNA与单体A混合后,再加入单体B,在引发剂和任选地催化剂的作用下使siRNA表面的自由基发生聚合反应,形成包封所述siRNA的壳;
所述引发剂包括过硫酸铵;
所述催化剂包括N,N,N',N'‑四甲基乙二胺。
7.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述引发剂为0.05%‑0.2% w/v的过硫酸铵溶液。
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,所述引发剂为0.1%w/v的过硫酸铵溶液。
9.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,所述催化剂为0.2%‑0.8% w/v的N,N,N',N'‑四甲基乙二胺溶液。
10.根据权利要求9所述的制备方法,其特征在于,所述催化剂为0.5%w/v的N,N,N',N'‑四甲基乙二胺溶液。
11.根据权利要求6所述的制备方法,其特征在于,将siRNA与胍基丙烯酸酯混合后,再加入双胱胺丙烯酰胺和丙烯酸酯聚乙二醇琥珀酰羧甲酯,在过硫酸铵和N,N,N',N'‑四甲基乙二胺的作用下使siRNA表面的自由基发生聚合反应,形成包封所述siRNA的壳。
12.根据权利要求11所述的制备方法,其特征在于,混合后siRNA与胍基丙烯酸酯的摩尔比为1:200‑250。
13.根据权利要求12所述的制备方法,其特征在于,混合后siRNA与胍基丙烯酸酯的摩尔比为1:220。
14.根据权利要求11所述的制备方法,其特征在于,胍基丙烯酸酯、双胱胺丙烯酰胺与丙烯酸酯聚乙二醇琥珀酰羧甲酯的摩尔比为3‑8:3‑8:1。
15.根据权利要求14所述的制备方法,其特征在于,胍基丙烯酸酯、双胱胺丙烯酰胺与丙烯酸酯聚乙二醇琥珀酰羧甲酯的摩尔比为5:5:1。
16.根据权利要求11所述的制备方法,其特征在于,通过搅拌的方式将siRNA与胍基丙烯酸酯混合。
17.根据权利要求16所述的制备方法,其特征在于,所述搅拌包括如下条件中的至少一个:
时间为10‑20分钟,温度为20‑25℃。
18.根据权利要求17所述的制备方法,其特征在于,搅拌的时间为15分钟,温度为20‑25℃。
19.根据权利要求11所述的制备方法,其特征在于,所述聚合反应包括如下条件中的至少一个:
在无氧环境下进行,温度为0‑5℃,时间为25‑35分钟。
20.根据权利要求19所述的制备方法,其特征在于,聚合反应在无氧环境下进行,温度为0℃,时间为30分钟。
21.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述靶向配体包括Angiopep‑2。
22.根据权利要求21所述的制备方法,其特征在于,所述Angiopep‑2与丙烯酸酯聚乙二醇琥珀酰羧甲酯的摩尔比为2‑5:1。
23.根据权利要求22所述的制备方法,其特征在于,所述Angiopep‑2与丙烯酸酯聚乙二醇琥珀酰羧甲酯的摩尔比为3:1。
24.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述连接靶向配体的反应包括如下条件中的至少一个:
温度为20‑25℃,时间为1.8‑2.2小时。
25.根据权利要求24所述的制备方法,其特征在于,连接反应的温度为20‑25℃,时间为
2小时。
26.根据权利要求5‑25任一项所述的制备方法,其特征在于,向500 µL siRNA水溶液中加入10 µL胍基丙烯酸酯,在20‑25℃下搅拌15分钟,得到siRNA与胍基丙烯酸酯的摩尔比为
1:220的混合液;向所述混合液中加入20 µL双胱胺丙烯酰胺和90 µL丙烯酸酯聚乙二醇琥珀酰羧甲酯,使胍基丙烯酸酯、双胱胺丙烯酰胺与丙烯酸酯聚乙二醇琥珀酰羧甲酯的摩尔比为5:5:1,然后加入20 µL的0.1%过硫酸铵溶液和10 µL的0.5% N,N,N',N'‑四甲基乙二胺溶液,在0℃的无氧环境下进行30分钟聚合反应后,加入45 µg Angiopep‑2并在20‑25℃下进行2小时连接反应,得到siRNA纳米胶囊;所述Angiopep‑2与丙烯酸酯聚乙二醇琥珀酰羧甲酯的摩尔比为3:1。
27.根据权利要求26所述的制备方法,其特征在于,在连接反应后还包括除杂的步骤,然后得到siRNA纳米胶囊。
28.根据权利要求26所述的制备方法,其特征在于,通过截留分子量10 kDa进行除杂。