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专利号: 202010338159X
申请人: 贵州师范大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 医学或兽医学;卫生学
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.桑葚多糖衍生物S-MFP-30在制备抗胃癌、非小细胞肺癌、乳腺癌、卵巢癌、胰腺癌及肝癌的药物中的应用。

2.根据权利要求1所述桑葚多糖衍生物S-MFP-30的应用,其特征在于:所述桑葚多糖衍生物S-MFP-30是桑葚多糖MFP-30-1的硫酸化衍生物,其硫酸化取代度为0.39%;MFP-30-1的单糖组成为甘露糖6.46%-7.14%、鼠李糖7.03%-7.77%、葡萄糖34.77%-38.43%和木糖46.74%-51.66%。

3.根据权利要求2所述桑葚多糖衍生物S-MFP-30的应用,其特征在于,所述桑葚多糖衍生物S-MFP-30的制备方法如下:将桑葚粉碎,依次用索氏提取法进行脱脂,用热水浸提法提取桑葚多糖,用Sevag法脱蛋白,再以低浓度乙醇分级沉淀法分离得不同组分桑葚粗多糖,然后采用DEAE-52纤维素柱层析对乙醇分级沉淀时乙醇浓度为30%的桑葚粗多糖MFP-30进行纯化并除掉其中色素,用蒸馏水洗脱得到的即桑葚多糖MFP-30-1;采用浓硫酸法修饰MFP-30-1,即得S-MFP-30。

4.根据权利要求3所述桑葚多糖衍生物S-MFP-30的应用,其特征在于,所述桑葚多糖衍生物S-MFP-30的制备方法具体包括以下步骤:(1)桑葚粉碎、脱脂:称取桑葚样品,粉碎成粉末,按料液比1∶2加入石油醚,用索氏提取法对其进行脱脂处理,每次2h,脱脂3次,脱脂后滤掉废液,得脱脂桑葚;

(2)桑葚多糖的提取:采用热水浸提法,将脱脂桑葚置于洁净容器中,按料液比1∶3加入蒸馏水,于90℃恒温条件下进行热水浸提,2h后用纱布过滤,保存滤液,滤渣继续在相同条件下进行热水浸提,反复3次并合并滤液,将滤液离心去除小颗粒杂质,收集上清液,在60℃条件下用旋转蒸发仪对其进行浓缩,即得桑葚多糖提取物,备用;

(3)桑葚多糖提取物脱蛋白:采用Sevag法,将桑葚多糖提取物置于分液漏斗中,按体积比1∶2加入V三氯甲烷∶V正丁醇=4∶1的Sevag试剂,充分摇匀,静置,直至分液漏斗中的液体分层完毕后除去底层有机溶剂及中间层蛋白质,收集上层液,反复操作,直至分液漏斗中的溶液无明显絮状物沉淀析出为止,将收集的上层液离心除去蛋白质,收集上清液,备用;

(4)桑葚粗多糖的制备:采用低浓度乙醇分级沉淀的方法,向步骤(3)所得上清液中加入无水乙醇至乙醇浓度为30%,将其静置于4℃环境中24h,然后离心,收集上清液并获取沉淀,依次用无水乙醇、丙酮、乙醚洗涤沉淀3次,真空冷冻干燥,即得桑葚粗多糖MFP-30;

(5)桑葚多糖的纯化:采用DEAE-52纤维素柱层析对MFP-30进行纯化并除掉其中色素,具体为:准确称取MFP-30,加入蒸馏水搅拌溶解,配制浓度为6mg·mL-1的MFP-30溶液,将

20mL 6mg·mL-1的MFP-30溶液用300mL蒸馏水经DEAE-52纤维素柱进行分段洗脱,每段每管各收集10mL洗脱液,收集30管,采用苯酚-硫酸法对每段洗脱液进行紫外跟踪测定,直至无多糖为止,按照吸收峰情况合并组分,浓缩,透析,真空冷冻干燥,即得桑葚多糖MFP-30-1;

(6)硫酸化修饰:向锥形瓶中依次加入12mL浓硫酸、3mL正丁醇和0.50g硫酸铵,充分搅拌,冰浴至0℃后,加入500mg桑葚多糖MFP-30-1,反应4h,反应完成后用5mol·L-1NaOH中和PH至8,再用自来水透析2d,用蒸馏水透析1d,减压浓缩,再加入3倍95%乙醇于4℃环境下醇沉,离心,取沉淀,真空冷冻干燥后,即得硫酸化桑葚多糖S-MFP-30。

5.根据权利要求1所述桑葚多糖衍生物S-MFP-30的应用,其特征在于:所述胃癌为MKN-

45细胞相关的胃淋巴结;所述非小细胞肺癌为NCI-H1650细胞相关的肺癌和细支气管肺泡癌;所述乳腺癌为MCF-7细胞相关的乳腺癌;所述卵巢癌为OVCAR-3细胞相关的卵巢癌;所述胰腺癌为NCI-H1650、MCF-7、OVCAR-3细胞相关的胰腺癌;所述肝癌为HepG-2细胞相关的肝细胞癌。