1.一种利用核桃粕制备二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽的方法,其特征在于步骤如下:(1)醇洗:对脱脂核桃粕进行醇洗处理,得到醇洗核桃粕;
(2)酸洗:对醇洗核桃粕进行酸洗处理,得到核桃蛋白凝乳;
(3)剪切:将核桃蛋白凝乳与去离子水混合,进行高速剪切处理;
(4)水解:加入碱性蛋白酶在一定条件下进行酶水解得到粗酶解液;
(5)后处理:粗酶解液经脱盐与干燥后得到粉状的二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽。
2.根据权利要求1所述利用核桃粕制备二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽的方法,其特征在于:步骤(1)中,取脱脂核桃粕粉加入4 6倍体积、体积浓度为85%的乙醇溶液,在40 50℃的条件~ ~下搅拌洗涤0.5 2 h,之后抽滤;取出滤饼在30 40℃干燥以除去残余乙醇,得到醇洗核桃~ ~粕。
3.根据权利要求1所述利用核桃粕制备二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽的方法,其特征在于:步骤(2)中,将步骤(1)制备所得醇洗核桃粕与去离子水混合,配制成质量浓度为10% 15%的~悬浮液,调节pH 4.5 6.5,常温下搅拌1h,3000 5000 r/min离心15 30 min,收集沉淀;重复~ ~ ~上述步骤进行酸洗2 4次,收集沉淀,得到核桃蛋白凝乳。
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4.根据权利要求1所述利用核桃粕制备二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽的方法,其特征在于:步骤(3)中,将步骤(2)制备所得的核桃蛋白凝乳与去离子水混合,配制成质量浓度为8%~
12%的悬浮液,调节pH为8.0 9.0,温度50 65℃,剪切速度为8000 12000 r/min,剪切时间为~ ~ ~
4 10 min。
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5.根据权利要求1所述利用核桃粕制备二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽的方法,其特征在于:步骤(4)中,向步骤(3)所得高速剪切处理后的核桃蛋白悬浮液添加碱性蛋白酶,加酶量E/S为1.5% 3%,酶解过程维持温度50 65℃和pH 8.0 9.0恒定,酶解4 6 h后,将pH调节至中性,~ ~ ~ ~沸水浴灭酶10 min,3000 5000 r/min离心20 min,所得上清液即为粗酶解液。
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6.根据权利要求1所述利用核桃粕制备二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽的方法,其特征在于:步骤(5)脱盐时,物料质量浓度为2% 5%,pH为6.0 8.0,纳滤膜的截留分子量MWCO为150 300 ~ ~ ~Da,操作温度为20 30℃,压力在0.4 0.7 MPa之间,循环3 6次,收集截留液。
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7.根据权利要求1所述利用核桃粕制备二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽的方法,其特征在于:步骤(5)干燥时,对纳滤后收集的滤出液通过喷雾干燥得到粉状的二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽。
8.权利要求1-7之一所述方法制备得到的二肽基肽酶Ⅳ抑制活性肽的应用,其特征在于:将其应用于制备降血糖或抗氧化产品中。