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专利号: 2020105425130
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种测定葡萄糖‑6‑磷酸含量的方法,其特征在于,所述方法包括如下步骤:(1)将不同浓度的葡萄糖‑6‑磷酸分别与葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶、氧化型辅酶混合,孵育;然后分别加入对羟基苯甲酸、对羟基苯甲酸羟化酶和缓冲液,继续进行孵育,获得相应混合溶液;

(2)孵育结束后,分别向混合溶液中加入钛酸锶、特征显色底物和缓冲溶液,在可见光照射下,使用酶标仪进行光谱扫描,获得不同浓度下的吸光度的增量;所述的吸光度增量为不同葡萄糖‑6‑磷酸浓度相对葡萄糖‑6‑磷酸浓度为0时的吸光度增量;

(3)利用葡萄糖‑6‑磷酸的浓度与吸光度的增量构建线性关系,得到线性测定模型;

所述步骤(1)是将0.05 mM的氧化型辅酶,14 U/mL 的葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶,不同浓度的葡萄糖‑6‑磷酸混合,在30 40 ℃下孵育10‑15 min;

~

步骤(2)中钛酸锶的制备方法包括如下过程:将含钛化合物溶解在乙二醇中,获得澄清溶液,然后向其中滴入锶盐溶液,最后加入NaOH溶液,混匀形成混合体系;将混合体系转移至高压釜中进行反应;反应结束后,洗涤、干燥,得到白色粉末钛酸锶产物。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述特征显色底物为3,3’, 5,5’‑四甲基联苯胺和/或2,2’‑联氮基双(3‑乙基苯并噻唑啉‑6‑磺酸)二铵盐。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述氧化型辅酶选自氧化型辅酶Ⅰ和/或氧化型辅酶Ⅱ。

4.根据权利要求1‑3任一项所述的方法,其特征在于,所述方法还包括:按照步骤(1)和步骤(2),对待测样品进行孵育处理,测得相应的吸光度差值;然后通过步骤(3)的线性测定模型,计算得到待测样品中葡萄糖‑6‑磷酸的浓度。

5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,含钛化合物与锶盐的摩尔比为1:(1‑5)。

6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的含钛化合物选自钛酸四丁酯、四氯化钛;所述的锶盐选自氯化锶、硝酸锶。

7.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述锶盐溶液的浓度为0.1‑0.5 mol/L。

8.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述反应的温度为150‑200 ℃;反应的时间为20‑24 h。