1.一种抗氧化肽,其特征在于,所述抗氧化肽的氨基酸序列为ITTNPYDY或IGWSPLGSL。
2.一种权利要求1所述的抗氧化肽的制备方法,其特征在于,以新鲜鸡胸肉为原料提取肌原纤维蛋白,然后,采用胃蛋白酶酶解所得肌原纤维蛋白,再经分离纯化及合成技术得到抗氧化肽;
所述肌原纤维蛋白的提取包括下述过程:将鸡胸肉剔除可见的脂肪结缔组织,用刀斩碎成肉糜,加入四倍体积的蛋白提取液均质25s,在4℃下以5000r/min离心15min,弃上清液留沉淀;加入蛋白提取液重复上述操作两次得粗蛋白;所用蛋白提取液的组成为:NaCl的浓度为0.1mol/L,MgCl2的浓度为0.002mol/L,EDTA·2Na的浓度为0.001mol/L,NaH2PO4/Na2HPO4的浓度为0.1mol/L,pH值为7.0;将所得粗蛋白与4倍体积浓度为0.1mol/L的NaCl溶液混合,均质25s,在4℃下以5000r/min离心15min,弃上清液留沉淀;再加入浓度为0.1mol/L的NaCl溶液重复上述操作两次,所得沉淀即为鸡胸肉肌原纤维蛋白;
所述酶解的条件为:用浓度为0.5mol/L的NaCl溶液分散所得肌原纤维蛋白,蛋白浓度为10mg/mL,酶与底物比为3000U/g,pH值为2‑3,温度为25‑35℃,酶解时间为2‑3h;
所述分离纯化包括下述步骤:
(1)利用截留分子量为3KDa的超滤膜对酶解产物进行超滤分离,收集分子量小于3KDa的组分;
(2)采用Sephadex G‑15凝胶色谱对上述组分进行分离,以去离子水为洗脱液,流速为
0.8mL/min,测量洗脱组分在214nm下的吸光度值,并测定各吸收峰对应的洗脱组分的抗氧化活性;
(3)收集经凝胶色谱分离的具有最佳抗氧化活性的峰,采用液相色谱质谱联用仪对该9
峰所包含的肽段进行氨基酸序列测定,获得峰面积大于8×10的肽段,氨基酸序列分别为ITTNPYDY、IGWSPLGSL、ITTNPYDYHY和LRVAPEEHPTL;
所述合成技术为Fmoc固相合成技术,依次合成所得氨基酸序列分别为ITTNPYDY、IGWSPLGSL、ITTNPYDYHY和LRVAPEEHPTL的4条多肽,并比较4条多肽的抗氧化活性,得到氨基酸序列为ITTNPYDY或IGWSPLGSL的抗氧化肽作为本发明的抗氧化肽。