1.一种AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器的制备方法,其特征在于,①预处理:AChE用Tris-HCl缓冲液溶解稀释,CHO用PBS缓冲液溶解稀释,ACh和神经毒性农药溶液用水配制,在测试之前,AChE和CHO应先活化;
②标准曲线的绘制:将一系列不同浓度的神经毒性农药溶液,先与适量的预处理过的AChE孵育一段时间,然后依次加入过量的预处理过的ACh和CHO,继续孵育一段时间,再与Fe2+混合一段时间,利用低场核磁共振波谱仪收集T2值,以样品浓度的对数为横坐标,以横向弛豫时间为纵坐标,建立标准曲线,计算得到标准曲线的线性回归方程;
③待测样品的测定:将待测样品先与适量的预处理过的AChE孵育一段时间,然后依次加入过量的预处理过的ACh和CHO,继续孵育一段时间,再与Fe2+混合一段时间,利用低场核磁共振波谱仪收集T2值,并将其代入线性回归方程中,计算得到待测样品的神经毒性农药浓度。
2.根据权利要求1所述的一种AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器的制备方法,其特征在于,步骤②和步骤③中神经毒性农药溶液先与适量的预处理过的AChE在37℃孵育
30-60min,然后依次加入过量的预处理过的ACh和CHO,继续孵育20-40min,再与Fe2+混合0-
20min。
3.根据权利要求1所述的一种AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器的制备方法,其特征在于,Fe2+、ACh、AChE和CHO的最佳浓度分别为5mM、5mM、500U·L-1和2000U·L-1。
4.根据权利要求1所述的一种AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器的制备方法,其特征在于,所述Tris-HCl缓冲液的浓度为10mM、pH=7.2-8.5,PBS缓冲液浓度为10mM、PH=
7-8,ACh和啶虫脒溶液用超纯水配制。
5.根据权利要求1所述的一种AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器的制备方法,其特征在于,在测试之前,AChE和CHO应在室温下活化10分钟,并在7天内使用。
6.根据权利要求1所述的一种AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器的制备方法,其特征在于,所述线性回归方程为:Y=63.49X+139.17,R2=0.98,X=Lg[啶虫脒浓度(μg·mL-1),Y=ΔT2,LOD=2.66ng mL-1,S/N=3,n=3,RSD=3.8%。
7.根据权利要求1所述的一种AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器的制备方法,其特征在于,所述Fe2+来自于FeSO4。
8.根据权利要求1-7任一项所述的方法制备的一种AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器。
9.根据权利要求8所述的一种AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器用于检测神经毒性农药的残留。
10.根据权利要求9所述的一种AChE和CHO双酶介导的磁弛豫开关传感器用于检测吡虫啉、啶虫脒或氯噻啉的残留。