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专利号: 2020106301277
申请人: 宁波大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-02-23
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测葡萄糖氧化酶及脲酶的电化学生物传感新方法及其应用,其特征在于,机理如下:本发明基于i-motif探针构象转换实现葡萄糖氧化酶及脲酶检测。在TdT催化反应后,形成一条富C DNA长链,该链在酸性条件下,会形成独特的i-motif结构,在中性或碱性条件下,i-motif不稳定,以无规则DNA单链状态存在。葡萄糖氧化酶反应液由于葡萄糖酸的生成导致反应液pH下降呈酸性,从而致使TdT催化生成的富C DNA长链部分质子化形成i-motif结构,有利于电子的传导,电化学阻抗明显降低。反之,脲酶反应液由于大量OH-生成导致反应液pH上升呈碱性,从而致使TdT催化生成的富C DNA长链由i-motif结构变成无规则DNA单链状态,阻碍电子的传导,电化学阻抗明显增加。通过反应液孵育前后的阻抗值变化实现葡萄糖氧化酶和脲酶的分析检测。与此同时,当加入葡萄糖氧化酶抑制剂或脲酶抑制剂,由于酶活性被抑制导致葡萄糖氧化反应与尿素分解反应被抑制,实现抑制剂的分析监测。

2.根据权利要求1所述的一种检测葡萄糖氧化酶及脲酶的电化学生物传感新方法及其应用,其特征在于:第一次将TdT延伸的富C DNA长链用于葡萄糖氧化酶及脲酶电化学阻抗传感器的构建及应用。

3.根据权利要求1-2所述的一种检测葡萄糖氧化酶及脲酶的电化学生物传感新方法及其应用,其特征在于:本发明传感器具有良好的选择性,可以实现不同浓度葡萄糖氧化酶检测,检测限为0.0061U/L,对抑制剂Cu(II)的IC50为10.23μM。

4.根据权利要求1-2所述的一种检测葡萄糖氧化酶及脲酶的电化学生物传感新方法及其应用,其特征在于:本发明传感器具有良好的选择性,可以实现不同浓度脲酶检测,检测限为0.0028U/L,对抑制剂AHA的IC50为5.62mM。