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专利号: 2020107073352
申请人: 宁波大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 测量;测试
更新日期:2024-01-08
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.基于谷胱甘肽、谷胱甘肽还原酶和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶的电化学逻辑门,具体制备步骤如下:(1)GSH‑Ag(I)CP的制备

依次取1~10μL浓度为0.1~20mM的硝酸银水溶液、1~10μL浓度为0.1~20mM谷胱甘肽水溶液,混合均匀后加入磷酸缓冲溶液配成50~120μL的溶液,将溶液在25~40℃下缓缓震荡8~17min,即得到GSH‑Ag(I)CP,使用前将GSH‑Ag(I)CP溶液与50~120μL 0.02%wt Nafion溶液混合均匀,静置5~20min;

(2)电化学生物传感器的制备

a.将玻碳电极在麂皮上依次用粒径0.3μm、0.05μm的三氧化二铝粉末抛光0.5~5min,抛光后将电极置于超声清洗器中用超纯水超声清洗1~5min,然后用N2吹干,记为GCE;

b.利用循环伏安法,设置电位范围为‑1.5~0.5V、扫速5~20mV/s将0.7~2.4mg/mL石墨烯GO醋酸分散液电沉积到裸玻碳电极上得到GO/GCE;然后取5~15μL步骤(1)中溶液滴涂于GO/GCE上,室温下静置20~60min,用超纯水缓缓冲洗电极,记为CP/GO/GCE;

(3)逻辑门的构建

100μL总体积的反应液包括:葡萄糖6‑磷酸1~20mM,氧化态的还原型辅酶II0.01~

10mM,葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶0.5~30U,GSSG 1~50mM和GSR 0.5~30U,37℃下反应2~

10min,将该反应液代替步骤(1)中的GSH实现GSH‑Ag(I)CP的制备,其余步骤同(1)和步骤(2);改变输入信号和输出信号,实现逻辑门的设计。

2.根据权利要求1所述的基于谷胱甘肽、谷胱甘肽还原酶和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶的电化学逻辑门,其特征在于,步骤(1)中磷酸缓冲溶液由Na2HPO4/NaH2PO4配制,浓度为10M,pH=7.0。

3.根据权利要求1所述的基于谷胱甘肽、谷胱甘肽还原酶和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶的电化学逻辑门,其特征在于,步骤(2)中醋酸分散液pH=5.0。

4.根据权利要求1所述的基于谷胱甘肽、谷胱甘肽还原酶和葡萄糖‑6‑磷酸脱氢酶的电化学逻辑门,其特征在于:所有逻辑门都以H2O2电化学信号为信号输出,不同逻辑门具有不同的输入信号:①以Ag(I)为信号输入构建“YES”逻辑门;②以GSH为信号输入构建“YES”逻辑门;③以Ag(I)和GSH为信号输入构建“AND”逻辑门;④以GSSG和NADPH为信号输入构建“AND”逻辑门;⑤以NADP+和GSSG为信号输入构建“AND‑AND”逻辑门;⑥以NADP+、GSSG和Ag(I)为信号输入构建“AND‑AND‑AND”逻辑门。