1.一种喹啉基近红外罗丹明比率荧光探针,其特征在于,为Probe RhQ,结构式如下:。
2.一种如权利要求1所述的喹啉基近红外罗丹明比率荧光探针的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)将4‑取代‑2‑硝基苯甲醛与1,3‑环己二酮在铁粉和乙酸作用下缩合,经过后处理得到粗品,再在二氯甲烷中加入三溴化硼,反应结束后处理得到缩合产物;
(2)将步骤(1)缩合产物与 4‑二乙氨基酮酸在浓硫酸中加热反应,反应结束后经过后处理得到所述的喹啉基近红外罗丹明荧光染料RQ2;
所述的4‑取代‑2‑硝基苯甲醛为4‑二甲氨基‑2‑硝基苯甲醛;
(3)将步骤(2)所述的荧光染料RQ2经过POCl3酰氯化后,与3,5‑双(三氟甲基)苯硫酚反应,后处理得到喹啉基近红外罗丹明比率荧光探针。
3.一种如权利要求1所述的比率荧光探针在制备生物硫醇检测试剂中的应用。
4.根据权利要求3所述的比率荧光探针在制备生物硫醇检测试剂中的应用,其特征在于,所述的生物硫醇为半胱氨酸和高半胱氨酸。
5.根据权利要求3或4所述的比率荧光探针在制备生物硫醇检测试剂中的应用,其特征在于,所述的荧光探针用于生物硫醇的定性检测,具体方法如下:将所述的荧光探针配置成测试溶液,然后加入待测样品,分别用410nm和630nm光源激发,测定462nm和712nm处荧光发射强度变化,若462nm处荧光强度变强,712nm处荧光强度变弱,则确定待测样品中含有半胱氨酸或高半胱氨酸;
所述的测试溶液的溶剂为PBS和EtOH的混合溶液,体积比为 1:1。
6.根据权利要求3或4所述的近红外比率荧光探针在制备生物硫醇检测试剂中的应用,其特征在于,所述的荧光探针用于生物硫醇的定量检测,具体方法如下:(1)将所述的荧光探针配置成测试溶液,然后加入待测样品,分别用410nm和630nm光源激发,测定462nm和712nm处荧光发射强度;
所述的测试溶液的溶剂为PBS和EtOH的混合溶液,体积比为 1:1;
(2)计算得到荧光强度比值I462nm/I716nm,根据荧光强度比值I462nm/I716nm得到待测样品中的半胱氨酸或高半胱氨酸的含量。
7.根据权利要求3或4所述的近红外比率荧光探针在制备生物硫醇检测试剂中的应用,其特征在于,所述的荧光探针用于细胞内荧光成像测试,具体方法如下:将待测细胞用含有荧光探针的溶液进行孵化,然后PBS洗涤三次,进行共聚焦细胞成像检测;
共聚焦细胞成像检测时,用两个波长分别激发并收集信号,激发波长为405nm时蓝色通道收集波长为420‑470nm,激发波长为630nm时红色通道收集波长为680‑730nm。