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专利号: 2020107768671
申请人: 重庆博视知识产权服务有限公司
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2024-11-18
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种检测透明质酸酶HAase的非诊断目的的方法,其特征在于:该方法采用的纳米复合材料是基于HAase-HA生物识别作用及自催化循环放大策略,所述的纳米复合材料采用细胞毒性低、生物相容性好的空心金纳米材料载带信号分子,利用透明质酸HA作为生物识别分子构建分子锁;

所述的分子锁是通过HA与带有氨基和巯基的聚乙二醇反应制得复合物HA-PEG-SH,然后再与空心金纳米材料反应构建而成;

所述的信号分子是罗丹明B;

所述的纳米复合材料的制备方法,包括如下步骤:

(1) 用pH=7.4的PBS缓冲溶液清洗20 μL巯基磁珠后,加入空心金纳米载体溶液200 μL,37(2)磁分离、清洗后加入终浓度为1.0×10

(3)磁分离、清洗后制得纳米载体复合物,保存备用;

(4)在0.5 mL 100 mg/mL HA水溶液中加入200 μL13 mg/mL羰基二咪唑的DMF溶液,室温反应2.0 h后,加入100 μL含有25 mg NH(5)经透析膜纯化,冷冻干燥,制得复合物HA-PEG-SH;

(6)将0.5 mL 2.4 mg/mL HA-PEG-SH的水溶液加入到步骤 (3) 制得的纳米载体复合物中,常温搅拌2.0 h;

(7)磁分离、清洗,最终制得用于检测HAase的纳米复合材料;

该方法包括以下步骤:

(1)取样本20 μL,加入到所述的纳米复合材料中,37(2)磁分离,取上清液用PBS缓冲溶液稀释至200 μL,并用0.1 mol/L的盐酸溶液调pH为5.0进行荧光检测。