1.白地霉ZJPH1907(Geotrichum candidum),保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏编号:CCTCC NO:M 2020282,保藏日期:2020年7月6日,地址:中国武汉武汉大学,邮编430072。
2.一种权利要求1所述白地霉ZJPH1907在制备(S)-2-氯-1-(3,4-二氟苯基)乙醇中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于所述应用的方法为:以白地霉ZJPH1907经发酵培养后获得的湿菌体为酶源,以2-氯-1-(3,4-二氟苯基)乙酮为底物,以pH值3.5~8.0的缓冲液为反应介质构成转化体系,在20~40℃、150~250rpm条件下进行反应,反应结束后,将转化液经分离纯化后,获得(S)-2-氯-1-(3,4-二氟苯基)乙醇产物。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述底物用量以转化体系总体积计为1g/L~
10g/L,湿菌体用量以转化体系总体积计为50~500g/L。
5.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述转化体系中还添加有辅助底物;所述辅助底物为下列一种或任意几种的混合:葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、乳糖、甘油、谷氨酸或赖氨酸。
6.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述辅助底物加入量以转化体系总体积计为
10~150g/L。
7.如权利要求5所述的应用,其特征在于所述转化体系中除了添加辅助底物外,还添加了助溶剂,所述助溶剂为吐温-60或吐温-80;所述助溶剂加入量以转化体系总体积计为1~
10g/L。
8.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述缓冲液为pH 4.2、0.025mol/L柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。
9.如权利要求7所述的应用,其特征在于所述缓冲液中加有疏水性天然低共熔溶剂构建两相反应介质,所述疏水性天然低共熔溶剂选自摩尔比均为1:1的下列之一:薄荷醇:辛烷,薄荷醇:百里酚或香豆素:百里酚;所述疏水性天然低共熔溶剂的体积加入浓度为10~
50%。
10.如权利要求3所述的应用,其特征在于所述酶源按如下方法制备:1)斜面培养:将白地霉ZJPH1907从甘油管中接种至斜面培养基中,30℃培养2d,重复接种活化2d,获得斜面菌体;所述斜面培养基组成为:葡萄糖15.0g/L,酵母膏10.0g/L,蛋白胨20.0g/L,KH2PO4 2.0g/L,(NH4)2SO4 2.0g/L,无水MgSO4 0.244g/L,NaCl 1.0g/L,琼脂20.0g/L,溶剂为水,pH 6.5;
2)种子培养:从斜面挑取一环菌体接入装液量为100mL种子培养基的250mL锥形瓶中,
30℃、200rpm条件下培养12h,获得种子液;所述种子培养基组成为:麦芽糖20.0g/L,葡萄糖
2.0g/L,酵母膏8.0g/L,牛肉膏11.9g/L,KH2PO4 0.98g/L,CaCl2 0.095g/L,溶剂为水,pH
7.5;
3)发酵培养:以体积浓度5~10%的接种量,将种子液移种至装有100mL发酵培养基的
250mL锥形瓶中,20~40℃、200rpm条件下培养18~28h,将发酵液离心,收集湿菌体,即为酶源;所述发酵培养基组成为:麦芽糖15~35g/L,葡萄糖1~5g/L,酵母膏4~12g/L,牛肉膏5~20g/L,KH2PO4 0.5~3.0g/L,CaCl2 0.05~0.3g/L,溶剂为水,pH 4.0~9.0。