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专利号: 2020109628948
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种提高枯草芽孢杆菌GlcNAc产量的方法,其特征在于,所述方法是通过在生产乙酰氨基葡萄糖的枯草芽孢杆菌中过表达二氢脂酰胺乙酰转移酶编码基因acoC。

2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的二氢脂酰胺乙酰转移酶编码基因acoC通过强组成型导型启动子P43调控表达。

3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的二氢脂酰胺乙酰转移酶编码基因acoC序列如SEQ ID NO.1所示。

4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,所述的枯草芽孢杆菌为枯草芽孢杆菌B.subtilis 168ΔnagP ΔgamP ΔgamA ΔnagA ΔnagB Δldh PxylA-glmS ΔglcK ΔpyK ΔkdgA ΔpckA P43-pfkA P43-fbaA P43-pckA ΔmelA ΔmalS ΔywkA ΔytsJ P43-bacpycA P43-glmS P43-glnA P43-gltC P43-EcglnA P43-bmqO P43-porAB P43-gor P43-nifH::lox72。

5.一种采用权利要求1-4任一项所述的方法构建得到的重组枯草芽孢杆菌。

6.根据权利要求5所述的重组枯草芽孢杆菌,其特征在于,所述的重组枯草芽孢杆菌是以强组成型启动子P43调控枯草芽孢杆菌中二氢脂酰胺乙酰转移酶编码基因acoC的表达得到。

7.一种权利要求5所述的重组枯草芽孢杆菌发酵生产乙酰氨基葡萄糖的方法,其特征在于,包括以下步骤:将重组枯草芽孢杆菌在种子培养基中活化,然后将活化后的种子转入发酵培养基,加入诱导剂进行发酵培养,得到乙酰氨基葡萄糖。

8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的种子培养基包括以下成分:8-12g/L胰蛋白胨、4-6g/L酵母粉和8-12g/L氯化钠。

9.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,所述的发酵培养基包括以下成分:18-22g/L葡萄糖、5-7g/L蛋白胨、10-14g/L酵母粉、5-7g/L硫酸铵、10-14g/L磷酸氢二钾、2-3g/L磷酸二氢钾、4-6g/L碳酸钙和8-12ml/L微量元素溶液。

10.根据权利要求9所述的方法,其特征在于,所述的微量元素溶液包括以下成分:0.8-

1.2g/L硫酸锰、0.3-0.5g/L氯化钴、0.1-0.3g/L钼酸钠、0.1-0.3g/L硫酸锌、0.05-0.15g/L氯化铝、0.05-0.15g/L氯化铜、0.04-0.06g/L硼酸和4-6mol/L盐酸。