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专利号: 2020110153437
申请人: 江南大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-10-10
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种β-葡萄糖苷酶突变体,其特征在于,所述突变体是将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的β-葡萄糖苷酶的第224位突变得到的。

2.如权利要求1所述的一种β-葡萄糖苷酶突变体,其特征在于,所述β-葡萄糖苷酶突变体为:将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的β-葡萄糖苷酶的第224位由甘氨酸突变为丙氨酸得到的;或将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的β-葡萄糖苷酶的第224位由甘氨酸突变为天冬酰胺得到的;或将氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示的β-葡萄糖苷酶的第224位由甘氨酸突变为缬氨酸得到的。

3.编码权利要求1或2所述β-葡萄糖苷酶突变体的基因。

4.携带权利要求3所述基因的表达载体。

5.携带权利要求3所述基因或权利要求4所述表达载体的微生物细胞。

6.一种制备低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述方法为将权利要求1或2所述的β-葡萄糖苷酶突变体添加至含有乳糖的反应体系中进行反应,得到反应液;从反应液中分离得到低聚半乳糖。

7.如权利要求6所述的一种制备低聚半乳糖的方法,其特征在于,所述β-葡萄糖苷酶突变体在反应体系中的加酶量为8-16U/mL;可选的,反应体系中,乳糖的浓度为350-450g/L;

可选的,所述反应的pH为5.8-6.2、温度为75-85℃。

8.一种制备烷基糖苷的方法,其特征在于,所述方法为:将权利要求1或2所述的β-葡萄糖苷酶突变体添加至含有糖基供体和糖基受体的反应体系中进行反应,得到反应液;从反应液中分离得到烷基糖苷;所述糖基供体为甲基葡萄糖苷和/或对硝基苯葡萄糖苷,所述糖基受体为脂肪醇。

9.如权利要求8所述的一种制备烷基糖苷的方法,其特征在于,所述β-葡萄糖苷酶突变体在反应体系中的加酶量为3.5-4.5μM;可选的,反应体系中,糖基供体的浓度为30-40mM;

可选的,反应体系中,糖基受体的浓度按照体积比为8%-87%;可选的,所述反应的pH为

5.8-6.2、温度为85-95℃。

10.权利要求1或2所述的突变体或权利要求3所述的基因或权利要求4所述的表达载体或权利要求5所述的微生物细胞在制备低聚半乳糖或烷基糖苷中的应用。