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专利号: 2020110158746
申请人: 浙江工业大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 生物化学;啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物学;酶学;突变或遗传工程
更新日期:2023-12-11
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种用于发酵法生产D-泛酸的菌株,其特征在于,将大肠杆菌serA基因或glyA基因中的至少一个与panB基因、panC基因一起克隆到保藏号为CCTCC NO:M2018914的大肠杆菌中进行过表达所得。

2.如权利要求1所述的菌株,其特征在于,各基因分别克隆到质粒pTrc99A中获得重组质粒后,将重组质粒转染到保藏号为CCTCC NO:M2018914的大肠杆菌中。

3.如权利要求1所述的菌株在发酵法生产D-泛酸中的应用。

4.一种发酵法生产D-泛酸的方法,其特征在于,使用如权利要求1或2所述菌株进行发酵培养生产D-泛酸。

5.如权利要求4所述的方法,其特征在于,先将菌株接种至平板培养基进行活化培养,获得活化菌;再将活化菌接种至种子培养基进行种子培养,获得种子液;最后再将种子液接种到发酵培养基中进行发酵培养。

6.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述平板培养基为:蛋白胨10g/L、酵母膏

10g/L、NaCl 5g/L、琼脂粉20g/L,pH=6.8-7.0。

7.如权利要求5所述的方法,其特征在于,所述种子培养基为:蛋白胨10g/L、酵母膏

10g/L、NaCl 5g/L,pH=6.8-7.0。

8.如权利要求5所述的方法,其特征在于,发酵培养使用的培养基为:葡萄糖20g/L,硫酸铵16g/L,酵母提取物2g/L,磷酸二氢钾0.8g/L,硫酸镁0.5g/L,β-丙氨酸1.5g/L,碳酸钙

10g/L,VB12 0.001g/L,VB1 0.001g/L,盐溶液1ml/L,异丙基硫代半乳糖苷0.1mmol/L;

所述盐溶液为:CuCl2 10g/L,FeSO4·7H2O 10g/L,ZnSO4·7H2O 1g/L,CuSO4 0.20g/L,NiCl2·7H2O 0.02g/L。

9.如权利要求5所述的方法,其特征在于,发酵培养使用的培养基为:葡萄糖56g/L,硫酸铵11.8g/L,酵母提取物2g/L,磷酸二氢钾0.8g/L,硫酸镁0.5g/L,β-丙氨酸1.5g/L,碳酸钙10g/L,VB12 0.001g/L,VB1 0.001g/L,盐溶液1ml/L,丝氨酸100mg/L,异丙基硫代半乳糖苷0.1mmol/L;

所述盐溶液为:CuCl2 10g/L,FeSO4·7H2O 10g/L,ZnSO4·7H2O 1g/L,CuSO4 0.20g/L,NiCl2·7H2O 0.02g/L。