1.一种基于赖氨酸-谷氨酰胺转氨酶的氧化损伤蛋白凝胶性能修复方法,其特征在于,包括以下步骤:步骤1、提取肌原纤维蛋白,得到肌原纤维蛋白膏;
步骤2、采用磷酸盐缓冲液对肌原纤维蛋白膏进行稀释,得到肌原纤维蛋白稀释液;
步骤3、在肌原纤维蛋白稀释液中,加入脂肪氧化体系,得到的氧化反应体系;氧化反应后,得到氧化损伤肌原纤维蛋白凝胶;
步骤4、在氧化损伤肌原纤维蛋白凝胶中加入凝胶性能修复剂,混匀后反应,得到反应后的肌原纤维蛋白凝胶;其中,凝胶性能修复剂采用赖氨酸溶液和谷氨酰胺转氨酶中的一种或两种;
步骤5、将反应后的肌原纤维蛋白凝胶置于密封容器中,水浴蒸煮,冷却,得到热诱导凝胶,所述热诱导凝胶即为性能修复后的肌原纤维蛋白凝胶。
2.根据权利要求1所述的一种基于赖氨酸-谷氨酰胺转氨酶的氧化损伤蛋白凝胶性能修复方法,其特征在于,步骤1中,肌原纤维蛋白膏制备过程具体如下:步骤11、将猪外脊肉去除脂肪及结缔组织,切条备用;
步骤12、在切条后的猪外脊肉中加入僵直液,均浆捣碎,离心,得到沉淀物;
步骤13、在步骤12的沉淀物中加入NaCl溶液,均浆搅拌,过滤,得到滤液;
步骤14,调节滤液pH至6.20-6.25,离心分离,得到沉淀,沉淀即为肌原纤维蛋白膏。
3.根据权利要求1所述的一种基于赖氨酸-谷氨酰胺转氨酶的氧化损伤蛋白凝胶性能修复方法,其特征在于,步骤2中,磷酸盐缓冲液的pH为6.20-6.25,磷酸盐缓冲液浓度为25-
30mmol/L。
4.根据权利要求1所述的一种基于赖氨酸-谷氨酰胺转氨酶的氧化损伤蛋白凝胶性能修复方法,其特征在于,步骤3中,氧化反应体系中肌原纤维蛋白的浓度为30-35mg/mL;脂肪氧化体系采用脂肪氧合酶-亚油酸体系;其中,脂肪氧合酶-亚油酸体系中亚油酸的浓度为
10-12mmol/L,脂肪氧合酶的浓度为3750-4000u/ml蛋白。
5.根据权利要求1所述的一种基于赖氨酸-谷氨酰胺转氨酶的氧化损伤蛋白凝胶性能修复方法,其特征在于,步骤3中,氧化反应过程采用在0-4℃环境中,反应8-12h;采用在氧化反应体系中,加入Trolox终止氧化反应;其中,Trolox的浓度为1-1.2mmol/L。
6.根据权利要求1所述的一种基于赖氨酸-谷氨酰胺转氨酶的氧化损伤蛋白凝胶性能修复方法,其特征在于,步骤4中,赖氨酸溶液的浓度为5-8mmol/L,谷氨酰胺转氨酶与肌原纤维蛋白底物的质量比为1:(500-550);加入凝胶性能修复剂混匀后反应2-3h。
7.根据权利要求1所述的一种基于赖氨酸-谷氨酰胺转氨酶的氧化损伤蛋白凝胶性能修复方法,其特征在于,步骤5中,水浴蒸煮过程,采用以1-2℃/min的升温速度,使水浴温度从20-25℃加热至75-80℃,并在75-80℃条件下保温10-15min。
8.根据权利要求1所述的一种基于赖氨酸-谷氨酰胺转氨酶的氧化损伤蛋白凝胶性能修复方法,其特征在于,步骤5中,冷却过程,采用在冷水浴中,冷却30-40min后,放置于0-4℃条件下冷藏处理8-12h。
9.根据权利要求1所述的一种基于赖氨酸-谷氨酰胺转氨酶的氧化损伤蛋白凝胶性能修复方法,其特征在于,步骤1中,肌原纤维蛋白提取过程采用在0-4℃条件下进行。
10.根据权利要求1所述的一种基于赖氨酸-谷氨酰胺转氨酶的氧化损伤蛋白凝胶性能修复方法,其特征在于,步骤1中,将制备的肌原纤维蛋白膏,置于碎冰中保存备用,并在48h内使用。