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专利号: 2020111907164
申请人: 临沂大学
专利类型:发明专利
专利状态:已下证
专利领域: 一般的物理或化学的方法或装置
更新日期:2024-01-05
缴费截止日期: 暂无
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摘要:

权利要求书:

1.一种单细胞阵列的获取方法,其特征在于,具体包括以下步骤:(1)制备超薄通孔金属片,清理后备用;

所述超薄通孔金属片的制备方法为激光打孔或微加工,所述超薄通孔金属片的厚度≤

10μm,孔径为10‑25μm;

(2)将超薄通孔金属片紧贴于基板,压紧至无气泡;

(3)抽取细胞悬液置于超薄通孔金属片的通孔区域,培养箱中静置;

(4)抽除细胞悬液,并用缓冲液冲洗通孔区域,然后取下超薄通孔金属片,即得所述单细胞阵列。

2.根据权利要求1所述的一种单细胞阵列的获取方法,其特征在于,步骤(2)中,先在基板上平铺一层缓冲层,再将超薄通孔金属片紧贴于缓冲层,压紧至无气泡。

3.根据权利要求1所述的一种单细胞阵列的获取方法,其特征在于,步骤(2)中,先采用包被物质在基板上形成一层包被层,再将超薄通孔金属片紧贴于包被层,压紧至无气泡。

4.根据权利要求1所述的一种单细胞阵列的获取方法,其特征在于,步骤(2)中,先在基板上平铺一层缓冲层,再采用包被物质在缓冲层上形成一层包被层,最后将超薄通孔金属片紧贴于包被层,压紧至无气泡。

5.根据权利要求2或4所述的一种单细胞阵列的获取方法,其特征在于,所述缓冲层为聚二甲基硅氧烷或水凝胶。

6.根据权利要求3或4所述的一种单细胞阵列的获取方法,其特征在于,所述包被物质为粘连蛋白、MSC促贴壁试剂、多聚赖氨酸、胶原蛋白和氨基丙基三乙氧基硅烷中的任意一种。

7.根据权利要求1‑4任一项所述的一种单细胞阵列的获取方法,其特征在于,步骤(1)中,所述清理的具体操作为:先将超薄通孔金属片置于无水乙醇中进行超声处理,然后依次使用无水乙醇和去离子水进行清洗,最后用氮气吹干,高压或紫外灭菌;其中,超声处理的功率为0.3‑0.5W/cm2,温度为20‑100℃,时间至少为5min。

8.根据权利要求1‑4任一项所述的一种单细胞阵列的获取方法,其特征在于,步骤(3)中,所述静置的时间为20‑120min,温度为36‑38℃,二氧化碳浓度为4%‑6%。

9.根据权利要求1‑4任一项所述的一种单细胞阵列的获取方法,其特征在于,步骤(4)中,所述缓冲液为磷酸盐缓冲液、汉可氏平衡盐溶液和杜氏磷酸盐缓冲液中的任意一种。