1.一种枇杷叶中分离制备科罗索酸和山楂酸的方法,包括:
(1)将枇杷叶粉碎成碎末,加入到8-20倍枇杷叶干重的甲醇溶液中,超声波提取,提取液冷却过滤、真空回收,得到甲醇粗提物;
(2)甲醇粗提物通过硅胶柱层析,梯度洗脱,收集洗脱液,回收溶剂后得到枇杷叶样品;
(3)将枇杷叶样品通过液-液色谱分离,收集与山楂酸和科罗索酸标准品Rf值相同及高效液相色谱保留时间相同的洗脱液,减压蒸去溶剂,得到山楂酸和科罗索酸的混合样品;
(4)将山楂酸和科罗索酸的混合样品通过液-液色谱分离,先收集山楂酸洗脱液,再收集科罗索酸洗脱液,跟踪检测至洗脱液中无山楂酸和科罗索酸组分后,停止收集,去除溶剂后分别得到山楂酸和科罗索酸;
所述步骤(4)的液-液色谱的两相溶剂中含有羟丙基-β-环糊精水溶液。
2.根据权利要求1所述的枇杷叶中分离制备科罗索酸和山楂酸的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,采用的两相溶剂包括乙酸乙酯、石油醚、水、无水乙醇,体积比为3~6:4~7:4~6:4~6。
3.根据权利要求1所述的枇杷叶中分离制备科罗索酸和山楂酸的方法,其特征在于,所述步骤(3)中,固定相体积与枇杷叶样品质量比为0.22~0.33mL/mg。
4.根据权利要求1所述的枇杷叶中分离制备科罗索酸和山楂酸的方法,其特征在于,所述步骤(4)中,加入羟丙基-β-环糊精水溶液的浓度为0.05~0.15mol/L。
5.根据权利要求1或4所述的枇杷叶中分离制备科罗索酸和山楂酸的方法,其特征在于,所述步骤(4)中,两相溶剂为乙酸乙酯、石油醚、羟丙基-β-环糊精水溶液和无水乙醇,体积比为1~5:5~9:5~7:3~5。
6.根据权利要求1所述的枇杷叶中分离制备科罗索酸和山楂酸的方法,其特征在于,所述步骤(4)中,用0.05~0.1mol/L浓度的盐酸或氨水调节流动相的pH值。
7.根据权利要求6所述的枇杷叶中分离制备科罗索酸和山楂酸的方法,其特征在于,流动相pH调节至6.5~7.5。
8.根据权利要求1所述的枇杷叶中分离制备科罗索酸和山楂酸的方法,其特征在于,步骤(4)中,停止收集洗脱液后,通过10~30%浓度盐酸将洗脱液酸化至pH为2~3,萃取、洗涤至中性,干燥、过滤后减压蒸去溶剂,过硅胶柱层析去除羟丙基-β-环糊精。